تفاوت کلیدی بین مخمر یک هیبرید و مخمر دو هیبرید این است که مخمر یک هیبرید یک روش آزمایشگاهی مبتنی بر تجزیه و تحلیل برهمکنشهای DNA-پروتئین است در حالی که مخمر دو هیبرید یک سنجش مبتنی بر آزمایشگاهی برای تجزیه و تحلیل برهمکنشهای پروتئین-پروتئین است.
مطالعه برهمکنشهای بین مولکول‌های سلولی می‌تواند به تعریف مکان‌های شناسایی درگیر در بیان ژن و مسیرهای پروتئین کمک کند. فعل و انفعالات DNA و پروتئین جزء فرآیندهای سلولی مانند تغییرات DNA و تنظیم رونویسی و غیره هستند. از سوی دیگر، برهمکنش پروتئین و پروتئین نقش حیاتی در فرآیندهای سلولی مانند همانندسازی، رونویسی، ترجمه و انتقال سیگنال دارند.بنابراین، شناسایی این برهمکنشهای مولکول‌های سلولی از طریق سنجش‌های مختلف بسیار مهم است. مخمر یک هیبرید و مخمر دو هیبرید دو سنجش مبتنی بر آزمایشگاهی برای تجزیه و تحلیل برهمکنشهای DNA-پروتئین و پروتئین-پروتئین هستند.
Yast One Hybrid چیست؟
Yeast one hybrid (Y1H) یک آزمایش مبتنی بر آزمایشگاهی برای تجزیه و تحلیل تعاملات DNA-پروتئین داخل سلولی است. این روش برای اولین بار توسط وانگ و رید در سال 1993 ایجاد شد. از آن زمان تا کنون قدرت بیشتری در تحقیقات بیولوژیکی نشان داده است. در این سنجش، دو جزء اصلی وجود دارد: طعمه DNA و طعمه های پروتئینی.
شکل 01: مخمر یک هیبرید
در این روش، ابتدا یک توالی DNA (طعمه DNA) در بالادست دو گزارشگر مختلف (HIS3، LacZ) کلون می شود.این سازه های گزارشگر در ژنوم یک سویه مخمر ادغام می شوند. فاکتورهای رونویسی به عنوان طعمه های پروتئینی در نظر گرفته می شوند. فاکتورهای رونویسی با دامنه فعال سازی رونویسی (AD) عامل رونویسی مخمر Gal4 به منظور ساخت پروتئین های هیبریدی ترکیب می شوند. کل این پروتئین هیبریدی قبل از وارد کردن آن به سویه مخمر در یک پلاسمید ادغام می شود. پس از معرفی پلاسمید نوترکیب، هنگامی که فاکتور رونویسی با قطعه DNA برهمکنش می‌کند، بخش AD بیان ژن گزارشگر (HIS3 یا LacZ) را فعال می‌کند. تعیین توالی پلاسمیدها امکان شناسایی فاکتور رونویسی که می تواند به قطعه DNA متصل شود را می دهد. اخیراً برای تحقیق در مورد تشخیص بیماری از روش هیبریدی مخمر یک استفاده شده است. بنابراین، در آینده، این روش به طور گسترده‌تری در تحقیقات علمی و درمان‌های پزشکی مورد استفاده قرار خواهد گرفت.
Yest Two Hybrid چیست؟
Yeast two hybrid (Y2H) یک سنجش مبتنی بر آزمایشگاهی برای تجزیه و تحلیل تعاملات پروتئین و پروتئین درون سلولی است.این روش در ابتدا توسط Stanley Fields و Ok-Kyu Song در سال 1989 یافت شد. این روش فعل و انفعالات پروتئین-پروتئین را با استفاده از فاکتور رونویسی Gal4 مخمر شناسایی می کند.
شکل 02: مخمر دو هیبرید
در این روش، ابتدا دو ترکیب (هیبرید) با استفاده از پروتئین های مورد علاقه ساخته می شوند: ادغام یک پروتئین با دامنه اتصال DNA (DBD) و با ادغام پروتئین دیگر با دامنه فعال کننده (AD) فاکتور رونویسی Gal4.. پروتئین ذوب شده با DBD به عنوان طعمه شناخته می شود در حالی که پروتئین ذوب شده با AD به عنوان طعمه شناخته می شود. در سویه مخمر، پس از تعامل طعمه و طعمه، DBD و AD در مجاورت نزدیک قرار می گیرند تا یک فاکتور رونویسی Gal4 عملکردی در بالادست ژن گزارشگر ایجاد کنند.فاکتور رونویسی عملکردی بیان ژن گزارشگر را فعال می کند. علاوه بر این، این روش در حال حاضر برای غربالگری برهمکنشهای پروتئین‌های غشایی انتگرال در سلول‌های پستانداران استفاده می‌شود.
شباهت‌های بین مخمر یک هیبرید و مخمر دو هیبرید چیست؟
- Yeast one hybrid و yeast two hybrid دو سنجش مبتنی بر آزمایشگاهی برای تجزیه و تحلیل برهمکنشهای DNA-پروتئین و پروتئین-پروتئین هستند.
- این سنجش از سویه های مخمر استفاده می کند.
- هر دو سنجش از دامنه فعال سازی (AD) فاکتور رونویسی Gal4 استفاده می کنند.
- آنها از بیان ژن گزارشگر (HIS3 یا LacZ) برای تشخیص تعاملات استفاده می کنند.
- آنها طعمه و طعمه دارند.
- هر دو سنجش در تحقیقات بیولوژیکی مدرن بسیار مفید هستند.
تفاوت بین مخمر یک هیبرید و مخمر دو هیبرید چیست؟
Yeast one یک سنجش مبتنی بر آزمایشگاهی برای تجزیه و تحلیل برهمکنشهای DNA و پروتئین است، در حالی که مخمر دو هیبرید یک سنجش مبتنی بر آزمایشگاهی برای تجزیه و تحلیل برهمکنشهای پروتئین و پروتئین است.بنابراین، این تفاوت اصلی بین مخمر یک هیبرید و مخمر دو هیبرید است. علاوه بر این، در مخمر یک هیبرید، طعمه یک قطعه DNA است و طعمه یک مولکول پروتئین است. از سوی دیگر، در مخمر دو هیبرید، طعمه و طعمه هر دو مولکول پروتئین هستند.
اینفوگرافیک زیر تفاوت‌های بین مخمر یک هیبرید و مخمر دو هیبرید را به شکل جدولی برای مقایسه کنار هم فهرست می‌کند.
خلاصه - مخمر یک هیبرید در مقابل مخمر دو هیبرید
مخمر یک هیبرید و مخمر دو هیبرید دو سنجش مهم در شرایط آزمایشگاهی هستند. هیبرید مخمر یک روش آزمایشگاهی مبتنی بر تجزیه و تحلیل برهمکنشهای DNA و پروتئین است در حالی که مخمر دو هیبرید یک آزمایش مبتنی بر آزمایشگاهی برای تجزیه و تحلیل برهمکنشهای پروتئین و پروتئین است. بنابراین، این تفاوت اصلی بین مخمر یک هیبرید و مخمر دو هیبرید است.
