تفاوت کلیدی - HPLC در مقابل LCMS
اجازه دهید ابتدا به معنای HPLC و LCMS قبل از تجزیه و تحلیل تفاوت بین HPLC و LCMS نگاه کنیم. کروماتوگرافی یک تکنیک جداسازی در آنالیز شیمیایی است که در آن اجزای نمونه در طی عبور از یک محیط کروماتوگرافی جدا می شوند. همچنین شامل تعامل با نمونه، فاز ثابت و فاز متحرک است. HPLC مخفف High Performance Liquid Chromatography است و به عنوان یک روش کروماتوگرافی مایع در شیمی تجزیه استفاده می شود. ترکیب کروماتوگرافی مایع و طیف‌سنجی جرمی (LCMS) برای تجزیه و تحلیل کمی مولکول‌های زیستی منتخب ایجاد شده است و در مقایسه با HPLC یک روش سنجش بسیار حساس، دقیق و خاص است.این تفاوت اصلی بین HPLC و LCMC است. این مقاله شما را با HPLC و LCMC آشنا می کند که با تجزیه و تحلیل شیمیایی سروکار دارند و در مورد تفاوت های HPLC و LCMS بحث می کنند.
HPLC چیست؟
کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) یک تکنیک جداسازی محبوب در شیمی تجزیه است. عمدتاً برای جداسازی اجزا، شناسایی و تعیین کمیت هر جزء در یک مخلوط استفاده می شود. پیش از این، این روش به عنوان کروماتوگرافی مایع با فشار بالا شناخته می شد، زیرا به پمپ ها بستگی داشت تا یک حلال مایع تحت فشار را که شامل مخلوط نمونه می شود از طریق یک ستون بسته بندی شده با یک ماده جاذب جامد جریان دهد. هر یک از اجزای موجود در مخلوط نمونه به طور متفاوتی با مواد جاذب جامد برهمکنش می‌کنند که منجر به نرخ‌های جریان متفاوت برای اجزای مختلف می‌شود. این می تواند منجر به جدا شدن اجزاء تشکیل دهنده در هنگام خروج از ستون HPLC شود.
HPLC برای کاربردهای مختلفی مانند تجزیه و تحلیل سطح ویتامین D در خون، استفاده غیرقانونی از دارو در ورزشکاران با شناسایی باقیمانده دارو در ادرار آنها، جداسازی اجزای یک نمونه بیولوژیکی پیچیده برای اهداف تحقیقاتی و تجزیه و تحلیل استفاده شده است. و تولید مواد دارویی
LCMS چیست؟
کروماتوگرافی مایع-طیف‌سنجی جرمی (LCMS) یک تکنیک تحلیلی است که توانایی‌های جداسازی فیزیکی کروماتوگرافی مایع را با توانایی‌های آنالیز جرمی طیف‌سنجی جرمی (MS) ترکیب می‌کند. کروماتوگرافی مایع یک تکنیک جداسازی است و از طیف سنجی جرمی برای تجزیه و تحلیل نسبت جرم به بار ذرات باردار استفاده می شود. جداسازی فیزیکی معمولاً توسط HPLC و به طور متناوب، LCMS که به عنوان HPLC-MS نیز شناخته می شود، به دست می آید. LCMS یک تکنیک تحلیلی غالب است که در مقایسه با HPLC از دقت، حساسیت و ویژگی بسیار بالایی برخوردار است. بنابراین، در بسیاری از کاربردها مانند اهداف تحقیقاتی، تجزیه و تحلیل دارو، تجزیه و تحلیل مواد غذایی، و غیره مفید است.
تفاوت بین HPLC و LCMC چیست؟
مخفف و تعریف HPLC و LCMC
HPLC: HPLC مخفف High-Performance Liquid Chromatography است. این یک تکنیک جداسازی است که عمدتاً برای جداسازی اجزا، شناسایی و تعیین کمیت هر جزء در یک مخلوط استفاده می شود.
LCMS: LCMS مخفف کروماتوگرافی مایع و طیف‌سنجی جرمی است. این یک تکنیک تحلیلی است که توانایی های جداسازی فیزیکی کروماتوگرافی مایع را با توانایی های آنالیز جرمی طیف سنجی جرمی (MS) ترکیب می کند.
ویژگی های HPLC و LCMC
طبقه بندی
HPLC: این فقط یک روش کروماتوگرافی مایع است.
LCMS: این ترکیبی از روش کروماتوگرافی مایع و روش طیف‌سنجی جرمی است.
کارایی
HPLC: در مقایسه با LCMS، آنالیز HPLC کارآمدتر و کندتر است.
LCMS: در مقایسه با HPLC، آنالیز LCMS کارآمد و سریع‌تر است.
حساسیت
HPLC: در مقایسه با LCMS، آنالیز HPLC حساسیت کمتری دارد.
LCMS: در مقایسه با HPLC، آنالیز LCMS حساس‌تر است.
ویژگی
HPLC: در مقایسه با LCMS، تجزیه و تحلیل HPLC کمتر خاص است.
LCMS: در مقایسه با HPLC، تجزیه و تحلیل LCMS خاص تر است.
دقت
HPLC: HPLC نتایج دقیق کمتری نسبت به LCMS برای تعیین برخی مواد شیمیایی می دهد.
LCMS: LCMS نتایج دقیق تری نسبت به HPLC برای تعیین برخی مواد شیمیایی می دهد.
کامپوننت
HPLC: HPLC را می توان به عنوان جزئی از LCMS در نظر گرفت.
LCMS: LCMS را نمی توان جزء HPLC در نظر گرفت.
منبع یون
HPLC: منبع یون در دستگاه HPLC وجود ندارد.
LCMS: منبع یون در ابزار LCMS وجود دارد.
برنامه ها
HPLC: یون‌ها، پلیمرها، مولکول‌های آلی و بیومولکول‌ها را می‌توان با استفاده از HPLC آنالیز کرد.
LCMS: مولکول‌های آلی و بیومولکول‌ها را می‌توان آنالیز کرد. بر خلاف HPLC، LCMS می تواند برای بررسی مخلوط های ناقص حل شده استفاده شود.
عملیات
HPLC: نمودار دستگاه HPLC در شکل 1 آورده شده است و معمولاً شامل نمونه‌بردار خودکار، پمپ‌ها و آشکارساز است. نمونه‌بردار مخلوط نمونه را وارد فاز متحرک (مخلوط تحت فشار حلال‌هایی مانند آب، استونیتریل و/یا متانول) می‌کند که آن را به ستون منتقل می‌کند. پمپ ها جریان و ترکیب مورد نظر فاز متحرک را از طریق ستون ارائه می کنند. ستون با جاذب پر می شود که یک ذره جامد دانه ای مانند سیلیس یا پلیمرها است. آشکارساز سیگنالی متناسب با میزان حضور اجزای تشکیل دهنده نمونه در ستون تولید می کند، بنابراین امکان تجزیه و تحلیل قابل اندازه گیری اجزای نمونه انتخابی را فراهم می کند. ابزار HPLC کنترل می شود و تجزیه و تحلیل داده ها توسط یک ریزپردازنده دیجیتال و نرم افزار کاربر ارائه می شود.
شکل 1: نمودار دستگاه HPLC
LCMS: نمودار ابزار LCMS در شکل 2 نشان داده شده است. عصاره نمونه در ستونی شامل HPLC قرار می گیرد. این ستون متابولیت های نمونه را بر اساس خصوصیات فیزیکی حفظ می کند و متابولیت های مختلف در بازه های زمانی مختلف به طیف سنج جرمی جریان می یابند. طیف سنجی جرمی برای ارزیابی جرم ذرات، برای تعیین آرایش عنصری یک مولکول و برای شفاف سازی ساختار مولکول استفاده می شود. با این حال، نمونه باید یونیزه شود تا مولکول های باردار تولید شود تا نسبت جرم به بار آنها تعیین شود. بنابراین، به جای ابزارهای HPLC، LCMS شامل سه ماژول اضافی مانند منبع آهن، تحلیلگر جرم و آشکارساز است. یک منبع یونی می تواند نمونه فاز گاز را به یون تبدیل کند و یک تحلیلگر جرمی که یون ها را بر اساس جرمشان با استفاده از میدان های الکترومغناطیسی گروه بندی می کند.در نهایت، یک آشکارساز مقادیر را کمیت می کند و داده های هر یون موجود در نمونه را تحویل می دهد. تکنیک LCMS را می توان هم برای کاربردهای کیفی و هم برای کاربردهای کمی استفاده کرد.
شکل 2: نمودار ابزار LCMS
در نتیجه، HPLC یک روش کروماتوگرافی مایع است در حالی که LCMS ترکیبی از کروماتوگرافی مایع و طیف سنجی جرمی است. هر دوی این تکنیک‌های آنالیز ویژگی‌های متفاوتی دارند، اما می‌توان از آنها برای شناسایی و تعیین کمیت ترکیبات غذایی، داروها و دیگر مولکول‌های زیست فعال استفاده کرد.
