تفاوت اصلی بین HPLC و HPLC سریع این است که فشار پمپی که ما برای HPLC استفاده می کنیم حدود 40 مگاپاسکال است در حالی که فشار پمپ برای HPLC سریع حدود 3-5 مگاپاسکال است.
رایج ترین تکنیکی که ما برای جداسازی اجزای یک مخلوط استفاده می کنیم "کروماتوگرافی مایع" است. تکنیک های مختلفی برای دستیابی به این هدف وجود دارد که از میان آنها HPLC بسیار محبوب است. HPLC مخفف عبارت High Performance Liquid Chromatography است که اجزای یک مخلوط مایع را به روشی سریع و کارآمد شناسایی، کمیت و جداسازی می کند. HPLC سریع یک کاربرد ویژه از HPLC است که اخیراً توجه دست اندرکاران مطالعه محلول ها را به خود جلب کرده است.
HPLC چیست؟
HPLC کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا است. از فشار بالا برای فشار دادن حلال ها به طوری که آنها از یک ستون عبور می کنند استفاده می کند. همچنین، این یک راه ایده آل برای جداسازی و مطالعه ترکیبات مختلف مانند اسیدهای آمینه، اسیدهای نوکلئیک، کربوهیدرات ها، استروئیدها، آنتی بیوتیک ها و هیدروکربن ها است. HPLC نسبت به سایر روش های جداسازی مخلوط ها از جمله وضوح بالاتر و آنالیز سریعتر مزایای زیادی دارد. نیاز به بسته بندی مجدد و بازسازی را از بین می برد و کنترل بهتری بر پارامترها ارائه می دهد و در نتیجه کارایی جداسازی را افزایش می دهد. در حالت ایده آل، HPLC برای کاربردهای در مقیاس بزرگ مناسب است، زیرا می تواند ذرات بسیار کوچک را جدا کند و اجازه استفاده از فشارهای بالا را می دهد که جریان آسان حلال ها را آسان می کند.
شکل 01: ستون HPLC
به طور خلاصه روش کار تکنیک HPLC به شرح زیر است. ابتدا باید نمونه را با استفاده از پمپ در مقادیر کم گسسته وارد جریان فاز متحرک کنیم. فشار پمپ باید در 40 مگاپاسکال حفظ شود. این جریان فاز متحرک از طریق ستون HPLC نفوذ می کند. سپس اجزای موجود در نمونه نیز از ستون عبور می کنند. اما سرعت حرکت آنها به دلیل تفاوت در برهمکنش بین اجزای نمونه و جاذب داخل ستون با یکدیگر متفاوت است. ما این جاذب را فاز ساکن می نامیم زیرا در داخل ستون قرار دارد (حرکت نمی کند). سپس، در انتهای ستون، می‌توانیم نمونه‌ای را که از ستون شسته می‌شود، جمع‌آوری کنیم، به این ترتیب، می‌توانیم اجزای موجود در نمونه را جداگانه جمع‌آوری کنیم.
Fast HPLC چیست؟
به تازگی، دانشمندان پژوهشی در موسسه تحقیقاتی Schering Plow یک تکنیک HPLC سریع را توسعه دادند که نسخه پیشرفته HPLC است زیرا امکان جداسازی سریعتر ترکیبات از مخلوط را فراهم می کند.همچنین، که به عنوان HPLC سریع شناخته می شود، این تکنیک از ذرات سیلیس هسته ذوب شده 2.7 میلیمتری استفاده می کند که از ذرات سیلیس متخلخل 0.5 میلی متری بر روی یک ذره سیلیس جامد ساخته می شود. این ذرات منحصربه‌فرد فرآیند جداسازی را بسیار سریع می‌کنند و همچنین با فشار برگشتی پایین نسبت به آنچه در HPLC استفاده می‌کنیم.
شکل 02: دستگاه FPLC
Fast HPLC نتایج قابل مقایسه با UPLC دریافت می کند، اما دانشمندان بر این باورند که این تکنیک برتر است زیرا به تجهیزات بسیار گران قیمت بسیار بالا نیاز ندارد. نکته جالب این است که HPLC سریع به هیچ پروتکل آزمایشگاهی جدیدی نیاز ندارد.
تفاوت بین HPLC و HPLC سریع چیست؟
HPLC کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا است و HPLC سریع یک شکل پیشرفته از کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا است.تفاوت اصلی بین HPLC و HPLC سریع این است که فشار پمپی که ما برای HPLC استفاده می کنیم حدود 40 مگاپاسکال است. در حالی که فشار پمپ برای HPLC سریع حدود 3-5 مگاپاسکال است. علاوه بر این، ما می‌توانیم ترکیبات مختلفی مانند اسیدهای آمینه، اسیدهای نوکلئیک، کربوهیدرات‌ها، استروئیدها، آنتی‌بیوتیک‌ها و هیدروکربن‌ها را با استفاده از تکنیک HPLC جدا کنیم در حالی که تکنیک HPLC سریع عمدتاً برای جداسازی پروتئین‌ها استفاده می‌شود.
اینفوگرافیک زیر اطلاعات بیشتری در مورد تفاوت HPLC و HPLC سریع ارائه می دهد.
خلاصه - HPLC در مقابل Fast HPLC
HPLC یک تکنیک کروماتوگرافی مایع است که در سراسر جهان بسیار محبوب شده است. Fast HPLC نسخه جدیدی از HPLC است، دانشمندان پژوهشی در موسسه Schering Plow این تکنیک جدید را توسعه دادند.تفاوت اصلی بین HPLC و HPLC سریع در فشار پمپی است که برای جداسازی استفاده می کنیم. به این معنا که؛ فشار پمپی که ما برای HPLC استفاده می کنیم حدود 40 مگاپاسکال است. اما، فشار پمپ برای HPLC سریع حدود 3-5 مگاپاسکال است.
