تفاوت اصلی بین HPLC فاز معکوس و فاز عادی این است که HPLC فاز معکوس از یک فاز ثابت غیرقطبی و یک فاز متحرک قطبی استفاده می کند در حالی که فاز عادی HPLC از یک فاز ثابت قطبی و یک فاز متحرک کمتر قطبی استفاده می کند.
HPLC فاز نرمال قدیمی ترین تکنیک HPLC است که Tswett در جداسازی عصاره های گیاهی خود استفاده کرد. او از گچ در یک ستون شیشه ای استفاده کرد. این روش کلاسیک کروماتوگرافی بود که منجر به نامگذاری آن به عنوان تکنیک "عادی" شد. از سوی دیگر، HPLC فاز معکوس، برعکس روش معمولی است که اخیراً دانشمندان توسعه داده اند.
HPLC فاز معکوس چیست؟
HPLC فاز معکوس یک تکنیک کروماتوگرافی است که در آن از فاز ثابت آبگریز استفاده می کنیم. در بین تمام روش‌های HPLC، ما از این روش تقریباً 70% استفاده می‌کنیم زیرا کاربرد وسیع و تکرارپذیری آن است. فاز ساکن غیرقطبی و فاز متحرک قطبی است.
بیشتر اوقات، دانشمندان از ترکیب آبی آب با یک حلال آلی قابل اختلاط و قطبی مانند استونیتریل یا متانول به عنوان فاز متحرک استفاده می کنند. بنابراین، آنالیت‌ها با فاز ثابت غیرقطبی برهمکنش می‌کنند.
HPLC فاز نرمال چیست؟
HPLC فاز نرمال یک تکنیک کروماتوگرافی است که در آن از فاز ثابت آبدوست استفاده می کنیم. این روش سنتی HPLC است، اگرچه ما آنقدر از آن استفاده نمی کنیم. فاز ثابت قطبی و فاز متحرک غیرقطبی است. مهمتر از آن، فاز متحرک این تکنیک 100% ارگانیک است. یعنی برای این کار از آب استفاده نمی شود.
شکل 01: یک نمایه نمونه برای کروماتوگرام HPLC فاز عادی و فاز معکوس با توجه به قطبیت اجزای آنالیت.
معمولاً، فاز ساکن شامل سیلیس، سیانو، دیول، فازهای پیوند آمینو و غیره است. فازهای متحرک شامل حلال‌های آلی مانند هگزان، اتیل استات و غیره است. این تکنیک بر اساس حفظ مولکول‌های حلال یا آنالیت بر روی فاز ثابت قطبی.
تفاوت بین HPLC فاز معکوس و فاز عادی چیست؟
HPLC فاز معکوس یک تکنیک کروماتوگرافی است که در آن از فاز ثابت آبگریز استفاده می کنیم. فاز ثابت این تکنیک غیرقطبی است در حالی که فاز متحرک قطبی است. علاوه بر این، دانشمندان از ترکیب آبی آب با یک حلال آلی قابل اختلاط و قطبی، مانند استونیتریل یا متانول به عنوان فاز متحرک در فاز معکوس HPLC استفاده می کنند.در مقابل، فاز نرمال HPLC یک تکنیک کروماتوگرافی است که در آن از فاز ثابت آبدوست استفاده می کنیم. فاز ثابت این تکنیک قطبی است در حالی که فاز متحرک غیرقطبی است. علاوه بر آن، دانشمندان از حلال های آلی مانند هگزان، اتیل استات و غیره به عنوان فاز متحرک HPLC فاز نرمال استفاده می کنند. اینفوگرافیک زیر تفاوت بین HPLC فاز معکوس و فاز عادی را به صورت جدولی نشان می دهد.
خلاصه - فاز معکوس در مقابل HPLC فاز عادی
تکنیک HPLC فاز معکوس و فاز عادی دو تکنیک کروماتوگرافی مایع هستند. تفاوت اصلی بین HPLC فاز معکوس و فاز عادی این است که HPLC فاز معکوس از یک فاز ثابت غیرقطبی و یک فاز متحرک قطبی استفاده می کند در حالی که فاز معمولی HPLC از یک فاز ثابت قطبی و یک فاز متحرک کمتر قطبی استفاده می کند.
