تفاوت کلیدی – HPLC در مقابل HPTLC
تفاوت اصلی بین HPLC و HPTLC این است که HPLC اجازه جداسازی کمی اجزا را در یک نمونه می دهد در حالی که HPTLC اجازه جداسازی کمی اجزا را در یک نمونه نمی دهد.
کروماتوگرافی یک روش جداسازی فیزیکی است که برای جداسازی و شناسایی اجزای یک مخلوط استفاده می شود. هر دو HPLC و HPTLC تکنیک های کروماتوگرافی هستند. HPLC کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا است. HPTLC کروماتوگرافی لایه نازک با کارایی بالا است.
HPLC چیست؟
HPLC کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا است. این یک تکنیک تحلیلی است که برای جداسازی، شناسایی و تعیین کمیت اجزای یک مخلوط استفاده می شود.در این روش نمونه در یک حلال مناسب حل می شود. سپس حلال به همراه نمونه از پمپی با فشار معین عبور داده می شود. پمپ با مواد جاذب جامد پر شده است. سپس برخی از اجزا به شدت به مواد جاذب متصل می شوند در حالی که اجزای دیگر به طور شل متصل می شوند. این امر باعث می شود که قطعات دارای دبی متفاوتی در پمپ باشند. بنابراین، اجزا را می توان به راحتی جدا کرد.
شکل 01: یک سیستم HPLC
مواد جاذب که پمپ را پر می کند به عنوان فاز ساکن شناخته می شود. حلال با نمونه محلول به عنوان فاز متحرک شناخته می شود. پمپ مورد استفاده در این تکنیک ستون نامیده می شود. ستون با یک ماده جاذب پر شده است که معمولاً ذرات سیلیس است. اندازه این ذرات ممکن است بین 2-50 میکرومتر باشد. فرآیند جداسازی تحت تأثیر ترکیب فاز متحرک و دمای سیستم است.برهمکنش بین فاز ساکن و جزء موجود در نمونه می تواند برهمکنش های آبگریز، برهمکنش های دوقطبی-دوقطبی، پیوند یونی و غیره باشد.
فشار عملیات HPLC به طور قابل توجهی بالاتر از فشار کروماتوگرافی مایع سنتی است. حدود 50-350 بار قرار دارد. تفاوت کروماتوگرافی مایع و HPLC در این است که در کروماتوگرافی مایع، نمونه تحت فشار گرانش از طریق ستون می افتد در حالی که در HPLC، نمونه از طریق ستون تحت فشار قرار می گیرد. اندازه ستون و ذرات جاذب نیز در مقایسه با کروماتوگرافی مایع سنتی بسیار کوچک است. با این حال، وضوح ارائه شده توسط روش HPLC برتر است.
HPTLC چیست؟
HPTLC کروماتوگرافی لایه نازک با کارایی بالا است. این شکل پیشرفته و خودکار TLC سنتی است. این تکنیک وضوح کارآمدی را در یک دوره زمانی کوتاه ارائه می دهد. در این روش تجزیه و تحلیل، می توان نمونه و یک مرجع را به طور همزمان تجزیه و تحلیل کرد که امکان مقایسه نمونه با مرجع را فراهم می کند.نسبت به سایر تکنیک های کروماتوگرافی، دقت تحلیلی بهبود یافته ای را ارائه می دهد. زمان صرف شده برای تجزیه و تحلیل کمتر است. این تکنیک یک تکنیک کم هزینه است.
شکل 02: تجزیه و تحلیل رنگهای غذایی با استفاده از HPTLC
روش HPTLC یک فرآیند ساده است و مرحله آماده سازی نمونه نیز حذف می شود (در TLC سنتی، مرحله آماده سازی نمونه قبل از جداسازی گنجانده شده است. این مرحله شامل تمیز کردن و غنی سازی است). حلال را می توان مستقیماً بدون هیچ گونه پیش تصفیه استفاده کرد، اگرچه سایر تکنیک های کروماتوگرافی نیاز به پیش تصفیه هایی مانند گاز زدایی، فیلتراسیون و غیره دارند.
ماده جاذب مورد استفاده در HPTLC سیلیس با اندازه ذرات بسیار کوچک است. در TLC سنتی، اندازه ذرات سیلیس 5-20 میکرومتر است در حالی که در HPTLC، 4-8 میکرومتر است. نمونه با استفاده از یک اپلیکاتور روی صفحه HPTLC اعمال می شود.این یک برنامه یکنواخت و ایمن می دهد. سپس صفحات در یک محفظه دارای فاز متحرک قرار می گیرند. محفظه باید از بخار فاز متحرک اشباع شود. پس از فرآیند HPTLC، لکه هایی که جابجا شده اند قابل شناسایی هستند. هنگام تشخیص لکه های روی صفحه، تکنیک HPTLC از یک ناحیه UV مناسب یا یک محفظه ید استفاده می کند.
تفاوت بین HPLC و HPTLC چیست؟
HPLC در مقابل HPTLC |
|
| HPLC کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا است. | HPTLC کروماتوگرافی لایه نازک با کارایی بالا است. |
| تکنیک | |
| در HPLC، فاز متحرک با حلال از یک ستون پر از فاز ساکن عبور می کند. | در HPTLC، نمونه روی یک صفحه TLC لکه‌دار می‌شود و در داخل یک محفظه حاوی فاز متحرک قرار می‌گیرد. سپس به نمونه اجازه داده می‌شود تا همراه با فاز متحرک به سمت صفحه حرکت کند. |
| اندازه گیری | |
| در HPLC، تفاوت بین نرخ جریان اجزا از طریق ستون برای جداسازی اجزا در نمونه استفاده می شود. | در HPTLC، تفاوت بین مسافت طی شده توسط هر جزء در نمونه برای جداسازی اجزای نمونه استفاده می شود. |
| جدایی کمی | |
| HPLC امکان جداسازی کمی اجزا را در یک نمونه فراهم می کند. | HPTLC اجازه جداسازی کمی اجزا را در یک نمونه نمی دهد. |
خلاصه - HPLC در مقابل HPTLC
HPLC و HPTLC دو تکنیک کروماتوگرافی هستند. تفاوت اصلی بین HPLC و HPTLC این است که HPLC اجازه جداسازی کمی اجزا را در یک نمونه می دهد در حالی که HPTLC اجازه جداسازی کمی اجزا را در نمونه نمی دهد.
