تفاوت کلیدی – TLC در مقابل HPTLC
TLC و HPTLC دو تکنیک شیمیایی هستند که برای جداسازی اجزای غیرفرار در یک مخلوط استفاده می شوند. تفاوت اصلی بین TLC و HPTLC این است که مواد جاذب در صفحه TLC دارای ذرات بزرگ هستند در حالی که صفحات HPTLC دارای ذرات بسیار کوچک مواد جاذب هستند.
TLC کروماتوگرافی لایه نازک است. HPTLC کروماتوگرافی لایه نازک با کارایی بالا است که در مقایسه با روش TLC یک تکنیک پیشرفته است.
TLC چیست؟
TLC یا کروماتوگرافی لایه نازک یک تکنیک شیمیایی پایه است که برای جداسازی اجزای غیرفرار در یک مخلوط استفاده می شود.این آزمایش با استفاده از ورقه های شیشه، پلاستیک یا کاغذ انجام می شود. این ورق با لایه نازکی از سلولز یا ژل سیلیکا (یک ماده جاذب) پوشیده شده است. این لایه نازک به عنوان فاز ثابت TLC شناخته می شود. این ورق به عنوان صفحه TLC شناخته می شود.
قبل از آزمایش، یک خط پایه و یک خط بالا با مداد روی صفحه TLC مشخص می شود. سپس نمونه در امتداد این خط با استفاده از یک لوله مویرگی لکه گیری می شود. پس از آن، صفحه TLC به صورت عمودی در یک فاز متحرک قرار می گیرد. فاز متحرک یک حلال (یا مخلوطی از حلال ها) است که در یک ظرف قرار می گیرد. هنگام قرار دادن صفحه TLC در این فاز متحرک، باید خط پایه را بیش از حاشیه حلال نگه داشت. در غیر این صورت، نمونه در حلال حل می شود.
صفحه TLC مجاز است برای مدتی در فاز متحرک بماند. سپس با گذشت زمان، فاز متحرک به دلیل عملکرد مویرگی به سمت صفحه بالا می رود. اگر نمونه در فاز متحرک محلول باشد، همراه با فاز متحرک به سمت بالا می رود.
اصل "مثل مانند را حل می کند" پشت این روش TLC است. این بدان معنی است که ترکیبات قطبی در حلال های قطبی حل می شوند در حالی که ترکیبات غیر قطبی در حلال های غیر قطبی حل می شوند. فاز ساکن معمولاً سیلیکاژل یا سلولز است که یک ترکیب قطبی است. فاز متحرک مورد استفاده یک حلال غیر قطبی مانند هگزان است. بنابراین، اگر نمونه حاوی اجزای غیر قطبی باشد، این اجزا همراه با فاز متحرک به سمت بالا مهاجرت می کنند. اجزای قطبی به صفحه می چسبند. در میان اجزای متحرک، ترکیبات غیرقطبی متوسط به کندی مهاجرت می کنند در حالی که ترکیبات بسیار غیرقطبی به سرعت مهاجرت می کنند. هنگامی که قسمت جلوی حلال به خط بالایی صفحه TLC رسید، صفحه خارج می شود و اجازه می دهیم خشک شود.
شکل 01: تکنیک TLC
اگر اجزای موجود در نمونه ترکیبات رنگی بودند، باید لکه‌های رنگارنگی روی صفحه در مکان‌های مختلف وجود داشته باشد.اما اگر اجزا بی رنگ بودند، باید از تکنیک های دیگری استفاده کرد. به عنوان مثال، اسپری نین هیدرین برای تشخیص آمونیاک یا آمین ها (آمین های اولیه و آمین های ثانویه).
HPTLC چیست؟
HPTLC یا کروماتوگرافی لایه نازک با کارایی بالا شکل پیشرفته کروماتوگرافی لایه نازک (TLC) است. وضوح و دقت HPTLC بسیار بالا است. اکثر مراحل این تکنیک را می توان خودکار کرد.
پلیت های مورد استفاده در HPTLC حاوی ذرات سیلیکاژل با اندازه بسیار کوچک و چگالی بسته بندی ژل روی پلیت بالاست. سطح صفحه صاف است و جداسازی موثری را ایجاد می کند. تجزیه و تحلیل سریعتر از تکنیک TLC است. حساسیت این روش نیز بالاست. در HPTLC، چندین نمونه مختلف را می توان در یک صفحه بدون هیچ مرحله آماده سازی نمونه جدا کرد.
تفاوت بین TLC و HPTLC چیست؟
TLC در مقابل HPTLC |
|
| TLC کروماتوگرافی لایه نازک است. | HPTLC کروماتوگرافی لایه نازک با کارایی بالا است. |
| تکنیک | |
| این یک تکنیک شیمیایی پایه است که برای جداسازی اجزای غیرفرار در یک مخلوط استفاده می شود. | این شکل پیشرفته کروماتوگرافی لایه نازک (TLC) است. |
| بشقاب | |
| صفحه TLC می تواند از کاغذ، پلاستیک یا شیشه ساخته شود که با مواد جاذب دارای ذرات بزرگ اعمال می شود. | صفحات HPTLC دارای ذرات بسیار کوچکی از مواد جاذب هستند. |
| وضوح | |
| روش TLC زمانی که نمونه دارای اجزایی با خصوصیات مشابه باشد وضوح ضعیفی ارائه می دهد. | روش HPTLC وضوح بالایی ارائه می دهد. |
| زمان | |
| تکنیک TLC یک تکنیک زمان‌بر است. | HPTLC نتایج را با سرعتی بالاتر از روش TLC ارائه می دهد. |
خلاصه - TLC در مقابل HPTLC
HPTLC شکل پیشرفته TLC است. تفاوت اصلی بین TLC و HPTLC این است که صفحه TLC می تواند از کاغذ، پلاستیک یا شیشه ساخته شود که با یک ماده جاذب دارای ذرات بزرگ اعمال می شود در حالی که صفحات HPTLC دارای ذرات بسیار کوچک مواد جاذب هستند.
