تفاوت اصلی بین HPLC و UPLC در این است که HPLC امکان تجزیه و تحلیل ذرات با اندازه حدود 5 میکرومتر را فراهم می کند در حالی که UPLC اجازه می دهد تا برای ذرات بسیار کوچکتر در حدود 2 میکرومتر.
HPLC و UPLC هر دو تکنیک‌های کروماتوگرافی مایع هستند که در جداسازی اجزای یک ترکیب مفید هستند. برای دانستن تفاوت بین HPLC و UPLC، ابتدا باید بدانیم HPLC چیست. این به این دلیل است که UPLC نسخه خاصی از HPLC است و اگر بدانیم HPLC چیست، به راحتی می توانیم آن را درک کنیم.
HPLC چیست؟
اصطلاح HPLC مخفف کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا است.این تکنیکی است که می توانیم از آن برای جداسازی اجزای مختلف یک ترکیب استفاده کنیم. همچنین، پرکاربردترین تکنیک برای شناسایی، کمیت و جداسازی اجزای یک مخلوط است. علاوه بر این، این تکنیک از فشار بالا برای فشار دادن حلال ها از طریق ستون استفاده می کند. علاوه بر این، کاربردهای عمده HPLC در بیوشیمی برای تجزیه و تحلیل اجزای تشکیل دهنده یک ترکیب است. این یک راه ایده آل برای جداسازی و شناسایی اسیدهای آمینه، اسیدهای نوکلئیک، پروتئین ها، هیدروکربن ها، آفت کش ها، کربوهیدرات ها، آنتی بیوتیک ها، استروئیدها و مواد معدنی بی شمار دیگر است.
شکل 01: سیستم HPLC در یک آزمایشگاه
به طور خلاصه روش کار تکنیک HPLC به شرح زیر است. ابتدا باید نمونه را با استفاده از پمپ در مقادیر کم گسسته وارد جریان فاز متحرک کنیم.فشار پمپ باید در 40 مگاپاسکال حفظ شود. سپس، این جریان فاز متحرک از طریق ستون HPLC نفوذ می کند. همچنین اجزای موجود در نمونه از ستون عبور می کنند. با این حال، سرعت حرکت آنها با یکدیگر متفاوت است. این تفاوت به دلیل تفاوت در برهمکنش بین اجزای نمونه و جاذب داخل ستون ایجاد می شود. ما این جاذب را فاز ساکن می نامیم زیرا در داخل ستون قرار دارد (حرکت نمی کند). ثانیاً در انتهای ستون می‌توان نمونه‌ای را که از ستون شسته می‌شود جمع‌آوری کرد. در آنجا می‌توانیم تفاوت‌ها را در زمان‌های ماندگاری برای هر جزء در نمونه تعیین کنیم.
UPLC چیست؟
اصطلاح UPLC مخفف کروماتوگرافی مایع با عملکرد فوق العاده بالا است. این یک نوع HPLC است، اما روش کار یکسان است. با این حال، برخلاف HPLC، این روش امکان تجزیه و تحلیل ذرات بسیار کوچک مانند ذرات کوچک 2 میکرومتری را فراهم می کند.
شکل 02: یک دستگاه UPLC
علاوه بر این، تجزیه و تحلیل سریع تری ارائه می دهد. در این روش از فشار پمپ 100 مگاپاسکال برای وارد کردن نمونه به ستون استفاده می کنیم. از این رو، این فشار بالا تایید می کند که کل نمونه به ستون وارد شده است. بنابراین، این در مقایسه با HPLC بسیار کارآمد است.
تفاوت بین HPLC و UPLC چیست؟
اصطلاح HPLC مخفف کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا است در حالی که اصطلاح UPLC مخفف کروماتوگرافی مایع با عملکرد فوق العاده بالا است. بنابراین، تکنیک UPLC نسخه توسعه یافته HPLC است. بنابراین، روش کار برای هر دو تکنیک یکسان است. با این حال، UPLC در مقایسه با HPLC کارآمدتر است زیرا از فشار پمپ بالایی استفاده می کند. فشار پمپ برای HPLC 40 مگاپاسکال است در حالی که برای UPLC 100 مگاپاسکال است. بنابراین، این تفاوت بین HPLC و UPLC است.مهمتر از همه، تفاوت اصلی بین HPLC و UPLC این است که HPLC امکان تجزیه و تحلیل ذرات با اندازه حدود 5 میکرومتر را فراهم می کند، در حالی که UPLC اجازه می دهد تا برای ذرات بسیار کوچکتر در حدود 2 میکرومتر.
خلاصه - HPLC در مقابل UPLC
UPLC شکلی از HPLC است. بنابراین، روش های عملیات یکسان است. اما، ما می توانیم برخی از ویژگی های بهبود یافته را در UPLC در مقایسه با HPLC پیدا کنیم. بنابراین، تفاوت هایی بین HPLC و UPLC وجود دارد. با این حال، تفاوت اصلی بین HPLC و UPLC این است که HPLC امکان تجزیه و تحلیل ذرات با اندازه حدود 5 میکرومتر را فراهم می کند در حالی که UPLC اجازه می دهد تا ذرات بسیار کوچکتر در حدود 2 میکرومتر را تجزیه و تحلیل کند.
