تفاوت اصلی بین رنگآمیزی پیشرونده و پسرونده در این است که در رنگآمیزی پیشرونده، بافت به اندازه کافی در محلول رنگآمیزی باقی میماند تا به نقطه پایانی مورد نظر برسد، در حالی که در رنگآمیزی پسرونده، بافت عمداً برای رنگآمیزی بیش از حد رها میشود تا زمانی که رنگ تمام عناصر بافت را اشباع می کند و سپس رنگ آمیزی می کند.
رنگ آمیزی تکنیکی است که اجزای بافت را برجسته و متمایز می کند و مشاهده زیر میکروسکوپ را امکان پذیر می کند. رنگ آمیزی H و E روش عمومی رنگ آمیزی بافت است که بیشتر در بافت شناسی استفاده می شود. از هماتوکسیلین و ائوزین (ضد رنگ) استفاده می کند.رنگآمیزی هستهای با استفاده از هماتوکسیلین میتواند با تکنیکهای رنگآمیزی پیشرونده یا پسرونده انجام شود. برخی از فرمولاسیون های هماتوکسیلین در رنگ آمیزی پیشرونده استفاده می شود. هماتوکسیلین مایر یک نمونه است. لکه های پیشرونده غلظت هماتوکسیلین پایینی دارند. از این رو، آنها به آرامی و به طور انتخابی کروماتین را رنگ می کنند. برخی از فرمول های دیگر در رنگ آمیزی رگرسیون استفاده می شود. هماتوکسیلین هریس در رنگ آمیزی پسرونده استفاده می شود. لکه های پسرونده دارای غلظت بالایی از هماتوکسیلین هستند. از این رو، لکه به سرعت در کل سلول پخش می شود.
رنگآمیزی پیشرونده چیست؟
رنگآمیزی پیشرونده تکنیکی است که به بافت موجود در محلول رنگآمیزی اجازه میدهد به اندازه کافی طولانی شود تا به نقطه پایانی مورد نظر برسد. بنابراین، نظارت مکرر بر کیفیت لکه برای تعیین تکمیل رنگ آمیزی مورد نیاز است. شدت رنگآمیزی با زمان غوطهوری کنترل میشود.
شکل 01: ساختار هماتوکسیلین
هماتوکسیلین گیل و هماتوکسیلین مایر ماهیتی پیشرونده دارند. برای این دو هماتوکسیلینگ، معمولاً در رنگآمیزی پیشرونده از زمان رنگآمیزی 5-10 دقیقه استفاده میشود. به طور کلی، هماتوکسیلین های پیشرونده غلظت کمتری دارند. از این رو، کروماتین را به آرامی و انتخابی رنگ می کنند. در رنگ آمیزی پیشرونده، هماتوکسیلین در درجه اول کروماتین را به شدت مورد نظر رنگ می کند. بنابراین، برای از بین بردن لکه اضافی نیازی به تمایز در الکل اسید رقیق نیست.
رنگآمیزی پسرونده چیست؟
رنگآمیزی پسرونده یک تکنیک رنگآمیزی سریعتر است که در آن بافت به طور عمدی بیش از حد رنگآمیزی میشود تا زمانی که رنگ تمام اجزای بافت را اشباع کند. سپس بافت به طور انتخابی رنگآمیزی میشود تا زمانی که به نقطه پایانی صحیح برسد. مرحله رنگ زدایی را تمایز می گویند. تمایز برای از بین بردن لکه های اضافی انجام می شود.معمولاً با استفاده از الکل اسید رقیق انجام می شود.
شکل 02: رنگ آمیزی H و E
Harris هماتوکسیلین نوع رایج هماتوکسیلین است. هماتوکسیلین های ارلیخ و دلافیلد نیز در رنگ آمیزی پسرونده استفاده می شوند. لکه های پسرونده دارای غلظت بالایی از هماتوکسیلین هستند. از این رو، آنها به سرعت کل سلول را پخش می کنند و کروماتین و سیتوپلاسم را رنگ می کنند. رنگآمیزی پسرونده زمانی ترجیح داده میشود که تمایز بسیار واضح عناصر بافتی مورد نیاز باشد.
شباهتهای بین رنگآمیزی پیشرونده و پسرونده چیست؟
- رنگآمیزی پیشرونده و پسرونده دو نوع تکنیک رنگآمیزی هستند.
- هر دو از رنگی به نام هماتوکسیلین استفاده می کنند.
تفاوت بین رنگآمیزی پیشرونده و پسرونده چیست؟
رنگآمیزی پیشرونده یک فرآیند رنگآمیزی کندتر است که در آن بافت به اندازه کافی در محلول رنگآمیزی باقی میماند تا به نقطه پایانی مورد نظر برسد. در مقابل، رنگآمیزی پسرونده یک فرآیند رنگآمیزی سریعتر است که در آن بافت به طور عمدی بیش از حد رنگآمیزی میشود و سپس رنگآمیزی میشود. بنابراین، این تفاوت اصلی بین رنگآمیزی پیشرونده و پسرونده است.
علاوه بر این، تفاوت مهم دیگر بین رنگآمیزی پیشرونده و پسرونده این است که رنگآمیزی پیشرونده نیازی به مرحله اضافی به نام تمایز ندارد، در حالی که رنگآمیزی پسرونده به تمایز برای از بین بردن لکههای اضافی نیاز دارد. علاوه بر این، لکههای پیشرونده دارای غلظت کم هماتوکسیلین هستند، در حالی که لکههای پسرونده دارای غلظت بیشتری از هماتوکسیلین هستند.
جدول اینفوگرافیک زیر تفاوتهای بیشتری را بین رنگآمیزی پیشرونده و پسرونده نشان میدهد.
خلاصه - رنگآمیزی پیشرونده در مقابل رگرسیون
رنگآمیزی پیشرونده یک تکنیک رنگآمیزی آهسته است که در آن بافت به اندازه کافی در محلول رنگآمیزی باقی میماند تا به نقطه پایانی برسد. بنابراین، رنگ آمیزی بیش از حد انجام نمی شود، رنگ آمیزی پیشرونده است. در مقابل، رنگآمیزی پسرونده یک تکنیک رنگآمیزی سریعتر است که در آن بافت بیش از حد رنگآمیزی میشود و سپس رنگآمیزی میشود. رنگآمیزی پیشرونده نیازی به تمایز (حذف لکه اضافی) ندارد در حالی که رنگآمیزی پسرونده به تمایز در الکل اسیدی رقیق برای از بین بردن لکه اضافی نیاز دارد. لکه های پیشرونده عموماً دارای غلظت کمی از هماتوکسیلین ها هستند در حالی که لکه های پسرونده دارای غلظت بیشتری از هماتوکسیلین ها هستند. بنابراین، این تفاوت بین رنگآمیزی پیشرونده و پسرونده را خلاصه میکند.