تفاوت کلیدی – Gram Stain در مقابل فرهنگ
رنگ آمیزی گرمتکنیک رنگ آمیزی است که برای تمایز باکتری ها به دو گروه با توجه به ضخامت لایه پپتیدوگلیکان در دیواره سلولی آنها انجام می شود. کشت روشی برای رشد و نگهداری میکروارگانیسم ها در شرایط آزمایشگاهی برای تجزیه و تحلیل های مختلف است. تفاوت اصلی بین لکه گرم و کشت در عملکرد آنهاست. سویه گرمی یک تکنیک رنگ آمیزی باکتری است که در آن کشت روشی برای رشد و نگهداری میکروارگانیسم ها است.
Gram Stain چیست؟
رنگ آمیزی گرمیک تکنیک رنگ آمیزی افتراقی مهم است که برای شناسایی باکتری در میکروبیولوژی استفاده می شود.این روش توسط باکتری شناس دانمارکی هانس کریستین گرام در سال 1884 معرفی شد. رنگ آمیزی گرم باکتری ها را به دو گروه عمده دسته بندی می کند: گرم مثبت و گرم منفی. اینها در طبقه بندی و شناسایی باکتری ها بسیار مهم هستند. رنگ آمیزی گرم به عنوان مرحله اولیه برای شناسایی باکتری انجام می شود.
باکتری ها بر اساس تفاوت در دیواره سلولی آنها گروه بندی می شوند. باکتری های گرم مثبت حاوی یک لایه پپتیدوگلیکان ضخیم در دیواره سلولی خود هستند در حالی که باکتری های گرم منفی حاوی یک لایه نازک پپتیدوگلیکان در دیواره سلولی خود هستند که در شکل 01 نشان داده شده است. دیواره سلولی.
شکل 1: باکتری های گرم مثبت و باکتری های گرم منفی
رنگ آمیزی گرم با استفاده از چهار معرف مختلف انجام می شود. لکه اولیه، رنگدانه، رنگ برنده و ضد لکه. کریستال ویولت و سافرانین به ترتیب به عنوان لکه های اولیه و ضد لکه عمل می کنند، در حالی که گرم ید و الکل 95 درصد به ترتیب به عنوان رنگ کننده و رنگ برنده عمل می کنند.
مراحل اساسی رنگ آمیزی گرم
- اسمیر باکتریایی روی یک لام شیشه ای تمیز تهیه می شود، حرارت ثابت و خنک می شود.
- اسمیر به مدت 1 تا 2 دقیقه با کریستال ویولت غرق می شود.
- اسمیر با آب لوله کشی آهسته شسته می شود تا لکه های اضافی پاک شود.
- گرم ید به مدت 1 دقیقه روی اسمیر اعمال می شود.
- اسمیر با آب لوله کشی آهسته شسته می شود
- اسمیر با الکل 95 درصد به مدت 2 تا 5 ثانیه شسته می شود و با آب لوله کشی آهسته شسته می شود.
- اسمیر به مدت 1 دقیقه با سافرانین ضدآغاز می شود
- اسمیر با آب لوله کشی آهسته شسته می شود، خشک می شود و زیر میکروسکوپ مشاهده می شود.
در پایان رنگ آمیزی گرم، باکتری های گرم منفی به رنگ صورتی مشاهده می شوند در حالی که باکتری های گرم مثبت به رنگ بنفش همانطور که در شکل 02 نشان داده شده است. نتیجه رنگ آمیزی گرم بر اساس ضخامت تعیین می شود. لایه پپتیدوگلیکان در دیواره سلولی آنها. در مرحله رنگ‌زدایی، لکه اولیه و ماده خشک به راحتی از باکتری‌های گرم منفی پاک می‌شوند و به دلیل داشتن یک لایه پپتیدوگلیکان نازک، بی‌رنگ می‌شوند. لکه اولیه در باکتری های گرم مثبت باقی می ماند زیرا آنها یک لایه پپتیدوگلیکان ضخیم دارند. لکه ضد لکه برای باکتری های گرم مثبت به دلیل باقی ماندن لکه اولیه موثر نخواهد بود. بنابراین باکتری های گرم مثبت در رنگ اصلی لکه، یعنی رنگ بنفش قابل مشاهده خواهند بود. لکه ضد باکتری های گرم منفی را لکه دار می کند و در رنگ پیکی که رنگ سافرانین است قابل مشاهده خواهد بود. از این رو به راحتی می توان باکتری ها را از طریق رنگ آمیزی گرم به دو گروه طبقه بندی کرد و در تمایز و شناسایی باکتری ها ارزشمند است.
شکل 2: کرنش گرم
فرهنگ چیست؟
کشت میکروبی روشی برای کشت و نگهداری میکروارگانیسم ها در شرایط آزمایشگاهی برای اهداف مختلف است. کشت ها بر اساس نوع و هدف کشت میکروارگانیسم در محیط های جامد، نیمه جامد و مایع رشد می کنند. کشت ها با مواد مغذی لازم و شرایط رشد مورد نیاز میکروارگانیسم ها فراهم می شوند. یک محیط کشت دارای اجزای مختلفی است مانند منبع انرژی، منبع کربن، منبع نیتروژن، مواد معدنی، ریز مغذی ها، آب، عامل جامدکننده و غیره. درجه حرارت، اکسیژن و pH بهینه باید با توجه به نوع میکروارگانیسم رشد یافته تنظیم شود.
انواع مختلفی از کشت های میکروبی وجود دارد. به عنوان مثال، کشت دسته ای، کشت مداوم، کشت چاقو، کشت آگار پلیت، کشت آبگوشت و غیره.با توجه به ترکیب محیط کشت، انواع مختلفی از محیط های کشت وجود دارد که به عنوان محیط های مصنوعی، محیط های نیمه مصنوعی و محیط های طبیعی شناخته می شوند. کشت های میکروبی در شرایط استریل در داخل یک محفظه مخصوص به نام جریان هوای آرام تهیه می شوند. محیط رشد و ظروف شیشه ای قبل از تلقیح میکروارگانیسم مورد نظر استریل می شوند. در شرایط استریل مناسب، میکروارگانیسم هدف به محیط مغذی استریل شده منتقل شده و در دمای بهینه انکوبه می شود. در داخل محیط، میکروارگانیسم ها با استفاده از مواد مغذی ارائه شده رشد کرده و تکثیر خواهند شد.
شکل 3: کشت باکتری در صفحه
تفاوت بین Gram Stain و Culture چیست؟
Gram Stain در مقابل فرهنگ |
|
| سویه گرم یک تکنیک رنگ آمیزی افتراقی است که برای تمایز و شناسایی باکتری ها استفاده می شود. | کشت میکروبی روشی برای رشد میکروارگانیسم در آزمایشگاه است. |
| کامپوننت | |
| این از معرف های مختلف از جمله دو لکه استفاده می کند. | این از محیط های کشت مختلف مانند محیط های جامد، نیمه جامد و مایع تشکیل شده از مواد مغذی و سایر شرایط ضروری استفاده می کند. |
| توابع پایه | |
| این امکان گروه بندی باکتری ها را به دو گروه می دهد: گرم منفی و گرم مثبت. | این امکان تکثیر میکروارگانیسم ها را برای اهداف مختلف فراهم می کند. |
| پایه | |
| نتیجه رنگ آمیزی گرم بر اساس تفاوت در لایه پپتیدوگلیکان دیواره سلولی است. | میکروارگانیسم ها در داخل محیط کشت رشد کرده و تکثیر خواهند شد. |
| نتیجه | |
| باکتری های گرم منفی در رنگ صورتی و باکتری های گرم مثبت در رنگ بنفش قابل مشاهده هستند. | روی صفحات، کلنی هایی از میکروارگانیسم ها دیده می شود. در محیط های مایع، میکروارگانیسم ها به صورت معلق هستند. |
خلاصه - Gram Stain در مقابل فرهنگ
کشت های میکروبی در شرایط آزمایشگاهی برای اهداف مختلف از جمله نگهداری، آزمایش، تصفیه شیمیایی و غیره تهیه و نگهداری می شوند. رنگ آمیزی گرم یک روش رنگ آمیزی است که باکتری ها را به دو گروه اصلی به نام باکتری های گرم منفی و باکتری های گرم مثبت متمایز می کند.بنابراین تفاوت بین رنگ آمیزی گرم و کشت در این است که رنگ آمیزی گرمی یک روش رنگ آمیزی باکتری ها است در حالی که کشت روشی برای رشد و نگهداری میکروارگانیسم ها در آزمایشگاه است.
