تفاوت اصلی بین کروماتوگرافی میل ترکیبی و تبادل یونی در این است که ما می توانیم از کروماتوگرافی میل ترکیبی برای جداسازی اجزای باردار یا بدون بار در یک مخلوط استفاده کنیم در حالی که می توانیم از کروماتوگرافی تبادل یونی برای جداسازی اجزای باردار در یک مخلوط استفاده کنیم.
کروماتوگرافی تکنیکی است که می توانیم از آن برای جداسازی اجزای مورد نظر در یک مخلوط استفاده کنیم. انواع مختلفی مانند کروماتوگرافی مایع، کروماتوگرافی گازی و غیره وجود دارد. کروماتوگرافی میل ترکیبی و کروماتوگرافی تبادل یونی دو زیرمجموعه کروماتوگرافی مایع هستند. همچنین در این تکنیک ها دو فاز وجود دارد. یعنی فاز ساکن و فاز متحرک هستند.هدف از این تکنیک ها جداسازی اجزا، بسته به اتصال اجزا، در فاز متحرک به سطح فاز ساکن است.
کروماتوگرافی قرابتی چیست؟
کروماتوگرافی میل ترکیبی یک تکنیک بیوشیمیایی است که ما از آن برای جداسازی اجزای یک مخلوط بسته به برهمکنش بین این اجزا استفاده می کنیم.
تعاملاتی که در این مورد استفاده می کنیم شامل موارد زیر است:
- برهم کنش آنتی ژن-آنتی بادی
- برهم کنش آنزیم-سوبسترا
- برهم کنش گیرنده-لیگاند
- برهم کنش پروتئین-اسید نوکلئیک
در این تکنیک از خواص مولکولی مولکول ها برای این تکنیک جداسازی استفاده می کنیم. در اینجا، ما به ترکیب مورد نظر اجازه می دهیم تا از طریق پیوند هیدروژنی، برهمکنش یونی، پل های دی سولفیدی، برهمکنش آبگریز و غیره با یک فاز ساکن برهم کنش داشته باشد.مولکول هایی که با فاز ساکن برهمکنش ندارند ابتدا شسته می شوند. بنابراین، می توانیم آن را از مخلوط جدا کنیم. ترکیب مورد نظر به فاز ثابت چسبیده باقی می ماند. بنابراین، می‌توانیم آن را با استفاده از یک حلال شسته‌کننده جدا کنیم و برای جدا کردن آن نیز آن را شسته کنیم.
شکل 01: یک ستون کروماتوگرافی
کروماتوگرافی میل ترکیبی در خالص سازی و تغلیظ یک ماده از مخلوط با استفاده از محلول بافر مفید است. همچنین، برای کاهش مواد ناخواسته در یک مخلوط مفید است. هنگام در نظر گرفتن دستگاهی که برای این فرآیند استفاده می کنیم، باید از ستونی پر از فاز ثابت خود استفاده کنیم. سپس، ما باید فاز متحرک را که حاوی مولکول‌های زیستی است که می‌خواهیم جدا کنیم، بارگذاری کنیم.در مرحله بعد، اجازه دهید آنها با فاز ثابت متصل شوند. پس از آن، با استفاده از یک بافر شستشو، می‌توانیم بیومولکول‌های غیرهدف را جدا کنیم، اما مولکول‌های هدف باید میل ترکیبی بالایی با فاز ساکن داشته باشند تا فرآیند جداسازی با موفقیت انجام شود.
کروماتوگرافی تبادل یونی چیست؟
کروماتوگرافی یونی شکلی از کروماتوگرافی مایع است که در آن می توانیم مواد یونی را تجزیه و تحلیل کنیم. اغلب، ما از آن برای تجزیه و تحلیل آنیون ها و کاتیون های معدنی (مانند آنیون های کلرید و نیترات و کاتیون های پتاسیم، سدیم) استفاده می کنیم. اگرچه کمتر رایج است، اما می توانیم یون های آلی را نیز تجزیه و تحلیل کنیم. علاوه بر این، ما می‌توانیم از این تکنیک برای خالص‌سازی پروتئین‌ها استفاده کنیم، زیرا پروتئین‌ها مولکول‌های باردار در مقادیر pH خاصی هستند. در اینجا، ما از یک فاز ثابت جامد استفاده می کنیم که ذرات باردار می توانند به آن متصل شوند. به عنوان مثال، ما می توانیم از کوپلیمرهای رزین پلی استایرن-دیوینیل بنزن به عنوان تکیه گاه جامد استفاده کنیم.
شکل 02: مراحل کروماتوگرافی تبادل یونی
برای توضیح بیشتر، فاز ساکن دارای یون های ثابتی مانند آنیون های سولفات یا کاتیون های آمین چهارتایی است. اگر بخواهیم خنثی بودن این سیستم را حفظ کنیم، هر یک از اینها باید با یک ضد یون (یونی با بار مخالف) مرتبط باشد. در اینجا، اگر ضد یون یک کاتیون باشد، سیستم را به عنوان رزین تبادل کاتیونی می نامیم. اما اگر ضدیون یک آنیون باشد، سیستم یک رزین تبادل آنیونی است.
پنج مرحله اصلی در فرآیند تبادل یونی وجود دارد؛
- مرحله اولیه
- جذب هدف
- شروع شستشو
- پایان شستشو
- بازسازی
تفاوت بین کروماتوگرافی میل ترکیبی و تبادل یونی چیست؟
کروماتوگرافی میل ترکیبی یک تکنیک بیوشیمیایی است که ما از آن برای جداسازی اجزای یک مخلوط بسته به برهمکنش بین این اجزا استفاده می کنیم در حالی که کروماتوگرافی یونی شکلی از کروماتوگرافی مایع است که در آن می توانیم مواد یونی را تجزیه و تحلیل کنیم. بنابراین، تفاوت عمده بین کروماتوگرافی میل ترکیبی و تبادل یونی در این است که ما می توانیم از کروماتوگرافی تبادل یونی فقط برای جداسازی مواد یونی استفاده کنیم در حالی که کروماتوگرافی میل ترکیبی قادر به جداسازی ذرات باردار و بدون بار است. هنگام در نظر گرفتن اصل کار، تفاوت بین کروماتوگرافی میل ترکیبی و تبادل یونی در این است که کروماتوگرافی میل ترکیبی به دلیل این واقعیت است که مولکول‌های هدف میل ترکیبی بالایی برای فاز ساکن دارند. با این حال، برای کروماتوگرافی تبادل یونی، مولکول های هدف دارای بار مخالف با سطح فاز ساکن هستند.
اینفوگرافیک زیر تفاوت بین کروماتوگرافی میل ترکیبی و تبادل یونی را به عنوان مقایسه ای کنار هم نشان می دهد.
خلاصه - Affinity در مقابل کروماتوگرافی تبادل یونی
به طور خلاصه، کروماتوگرافی میل ترکیبی و تبادل یونی دو شکل از تکنیک های کروماتوگرافی مایع هستند. تفاوت اصلی بین کروماتوگرافی میل ترکیبی و تبادل یونی در این است که ما می توانیم از کروماتوگرافی میل ترکیبی برای جداسازی اجزای باردار یا بدون بار در یک مخلوط استفاده کنیم در حالی که می توانیم از کروماتوگرافی تبادل یونی برای جداسازی اجزای باردار در یک مخلوط استفاده کنیم.
