تفاوت کلیدی – الکتروفورز مویرگی در مقابل الکتروفورز ژل
الکتروفورز تکنیکی است که برای جداسازی بیومولکول‌ها بر اساس بار ذرات، اندازه ذرات و شکل ذرات استفاده می‌شود. مهاجرت مولکول که به عنوان تحرک الکتروفورتیک شناخته می شود، به نوع پلیمر/ژل مورد استفاده، اندازه منافذ آن، ولتاژ ارائه شده، زمان اجرا و نسبت سطح به حجم بستگی دارد. انواع مختلفی از تکنیک های الکتروفورز بر اساس نوع زیست مولکول مورد استفاده وجود دارد. اولین نوع الکتروفورز که اختراع شد، الکتروفورز کاغذی بود که در آن از کاغذ نیتروسلولزی به عنوان محیط جداسازی مولکول های زیستی استفاده شد.اصل الکتروفورز ژل که در آن از ژل های با اندازه منافذ مختلف برای جداسازی مولکول های زیستی استفاده می شد، بعداً اختراع شد. تکنیک الکتروفورز ژل برای بهبود دقت تکنیک بیشتر اصلاح شد و یکی از این اصلاحات الکتروفورز مویرگی است. تفاوت اصلی بین الکتروفورز مویرگی و الکتروفورز ژل در این است که الکتروفورز ژل در یک صفحه عمودی یا افقی با استفاده از ژل پلیمری با اندازه منافذ استاندارد انجام می‌شود در حالی که الکتروفورز مویرگی در یک لوله مویرگی با مایع پلیمری یا ژل انجام می‌شود..
ژل الکتروفورز چیست؟
الکتروفورز ژل تکنیکی است که عمدتاً برای جداسازی اسیدهای نوکلئیک، پروتئین ها یا اسیدهای آمینه بر اساس بار، اندازه و شکل آن ها استفاده می شود. در این روش از یک ژل فیزیکی که یک ماده پلیمری است به عنوان محیط جداسازی استفاده می شود. رایج ترین ژل های مورد استفاده آگارز (برای جداسازی اسید نوکلئیک) و پلی آکریل آمید (برای جداسازی پروتئین) هستند. دستگاه الکتروفورتیک ژل شامل سینی ریخته گری ژل برای آماده سازی ژل، شانه های ریخته گری برای آماده سازی چاه ها، مخزن بافر، الکترودهای مثبت (آند) و منفی (کاتد) و واحد تامین ولتاژ می باشد.مولکول هایی مانند DNA یا RNA که دارای بار منفی هستند از کاتد به آند و مولکول هایی که دارای بار مثبت هستند برعکس حرکت می کنند. تهیه ژل بر اساس نیاز انجام می شود. در صورت نیاز به وضوح یا جداسازی مولکول‌ها، ژل با غلظت بالا با اندازه منافذ کمتر باید تهیه شود. مولکول های جدا شده روی ماتریس ژل پس از یک تکنیک رنگ آمیزی مشاهده می شوند. مولکول های جدا شده به صورت نوارهایی روی ماتریس ژل ظاهر می شوند.
شکل 01: الکتروفورز ژل
الکتروفورز ژل در تشخیص های مولکولی مانند انگشت نگاری DNA برای تعیین وجود یک قطعه DNA/RNA خاص یا یک پروتئین استفاده می شود. الکتروفورز ژل نیز خلوص نمونه زیست مولکول استخراج شده را تعیین می کند.الکتروفورز ژل به عنوان یک مرحله مقدماتی برای هیبریداسیون و به عنوان یک تجزیه و تحلیل تاییدی پس از تعیین توالی انجام می شود.
الکتروفورز مویرگی چیست؟
الکتروفورز مویرگی اصلاحی در الکتروفورز ژل است که از همان اصل جداسازی بر اساس بار، اندازه مولکول استفاده می کند، اما در یک لوله مویرگی با یک ماده ژل یا یک پلیمر مایع انجام می شود. مویرگ ها از سیلیس ذوب شده تهیه می شوند و هر لوله مویرگی دارای قطر داخلی 50-100μm و طول 25-100 سانتی متر است. نمونه ها به داخل لوله مویین حاوی مواد پلیمری تزریق می شوند و به سرعت نسبت به الکتروفورز ژل معمولی جدا می شوند. سیستم مویرگی به خوبی در داخل یک ژاکت عایق محافظت می شود که نمونه را از هر گونه آلودگی محافظت می کند. مویرگ ها را می توان با پلیمرهای مایع مانند هیدروکسی اتیل سلولز یا ژل های با وضوح بالا مانند پلی آکریل آمید پر کرد. الکتروفورز مویرگی وضوح بیشتری را ارائه می دهد. از این رو جداسازی دقیق تر است.الکتروفورز مویرگی از یک سیستم آشکارساز خودکار از طریق آنالیز اسپکتروفتومتری استفاده می کند. این به دلیل نسبت سطح به حجم بالاتر است.
شکل 02: الکتروفورز مویرگی
الکتروفورز مویرگی در شرایطی مانند پزشکی قانونی که در آن به دقت بالاتری نیاز است استفاده می شود و معمولاً استفاده نمی شود زیرا این روش پرهزینه است.
شباهت های بین الکتروفورز مویرگی و الکتروفورز ژل چیست؟
- جداسازی مولکول ها در هر دو روش بر اساس بار و اندازه مولکول است.
- هر دو تکنیک را می توان برای جداسازی اسیدهای نوکلئیک و پروتئین ها استفاده کرد.
- حجم نمونه هر دو تکنیک یکسان است.
- هر دو تکنیک از یک بافر برای تسهیل جداسازی استفاده می کنند.
تفاوت بین الکتروفورز مویرگی و الکتروفورز ژل چیست؟
الکتروفورز مویرگی در مقابل الکتروفورز ژل |
|
| الکتروفورز مویرگی تکنیکی است که مولکول‌های زیستی را روی یک لوله مویرگی با استفاده از یک محیط پلیمری مایع یا ژل جدا می‌کند. | الکتروفورز ژل تکنیکی است که با استفاده از یک محیط ژل پلیمری، مولکول‌های زیستی را در یک صفحه عمودی یا افقی جدا می‌کند. |
| جدایی | |
| در الکتروفورز مویرگی، جداسازی در داخل یک لوله مویرگی انجام می شود. | در الکتروفورز ژل، جداسازی در سطح عمودی یا افقی انجام می شود. |
| میانگین جدایی | |
| پلیمرهای مایع مانند هیدروکسی اتیل سلولز در الکتروفورز مویرگی استفاده می شود. | ژل ها، آگارز یا پلی آکریل آمید، به عنوان یک محیط در الکتروفورز ژل استفاده می شود. |
| پیوند متقابل | |
| وضوح بالا را می توان از الکتروفورز مویرگی به دست آورد. | رزولوشن در الکتروفورز ژل کم است. |
| نسبت سطح به حجم | |
| نسبت سطح به حجم در الکتروفورز مویرگی بالاست. | نسبت سطح به حجم در الکتروفورز ژل کم است. |
| تکنیک تشخیص | |
| تشخیص از طریق آشکارسازهای خودکار اسپکتروفتومتری در الکتروفورز مویرگی انجام می شود. | رنگ‌آمیزی و مشاهده از طریق transilluminator UV به عنوان تکنیک‌های تشخیص در الکتروفورز ژل انجام می‌شود. |
خلاصه - الکتروفورز مویرگی در مقابل الکتروفورز ژل
تشخیص مولکولی نقش مهمی در دنیای علمی دارد. شناسایی و خالص سازی DNA، RNA و پروتئین ها مراحل حیاتی در مراحل تشخیصی هستند. الکتروفورز تکنیکی است که مولکول های زیستی را هم در الکتروفورز ژل و هم در الکتروفورز ژل مویرگی بسیار پیشرفته جدا و شناسایی می کند. الکتروفورز ژل در یک صفحه عمودی یا افقی با استفاده از ژل پلیمری با اندازه منافذ استاندارد انجام می شود در حالی که الکتروفورز مویرگی در یک لوله مویرگی با مایع پلیمری یا ژل انجام می شود. این تفاوت بین الکتروفورز مویرگی و الکتروفورز ژل است. پس از تکمیل تکنیک الکتروفورز، بیومولکول‌ها برای به دست آوردن اطلاعات سطح بالاتر از طریق هیبریداسیون یا از طریق تکنیک‌هایی مانند اثر انگشت پردازش می‌شوند.
دانلود نسخه PDF الکتروفورز مویرگی در مقابل الکتروفورز ژل
می توانید نسخه PDF این مقاله را دانلود کنید و طبق یادداشت نقل قول برای اهداف آفلاین از آن استفاده کنید. لطفاً نسخه PDF را از اینجا دانلود کنید تفاوت بین الکتروفورز ژل و الکتروفورز مویرگی.
