تفاوت کلیدی – تک لایه در مقابل فرهنگ تعلیق
کشت بافت روشی است که برای القای رشد سلول هایی که از ارگانیسم جدا شده اند و در محیط های کشت مختلف رشد می کنند استفاده می شود. در کشت بافت، محیط کشت نقش مهمی دارد. سلول های مختلف بسته به ویژگی های فیزیولوژیکی و شیمیایی سلول ها در محیط های کشت مختلف رشد می کنند. کشت تک لایه و کشت سوسپانسیون دو نوع اصلی کشت هستند که در طی فرآیند کشت بافت مورد استفاده قرار می گیرند. کشت تک لایه یک کشت وابسته به لنگرگاه است که در آن سلول در حالی که به یک بستر متصل است رشد می کند و کشت سوسپانسیون یک کشت مستقل از لنگر است که در آن تجمعات سلولی برای ایجاد کشت سلولی در محیط مایع استفاده می شود.این تفاوت کلیدی بین کشت تک لایه و کشت سوسپانسیون است.
فرهنگ تک لایه چیست؟
کشت تک لایه به عنوان نوعی از کشت تعریف می شود که در آن سلول ها در یک لایه روی یک فلاسک یا پتری دیش حاوی محیط کشت کشت می شوند. کشت تک لایه به فرهنگ چسبنده یا فرهنگ وابسته به لنگر نیز گفته می شود. دلیل ارجاع به کشت چسبنده یا وابسته به لنگر این است که این سلول ها در طول رشد خود به بستری برای اتصال نیاز دارند. آنها به کشت سلولی حاوی سوبسترا می‌چسبند.
بسترهایی که در محیط کشت استفاده می شوند باید قبل از استفاده شارژ شوند. این بسترهای باردار، تعاملات سلول به سلول را تقویت می کنند. تخلیه کننده یون الکتریکی، پوشش های کاتیونی دو ظرفیتی و تابش گاما منابعی هستند که برای شارژ این بسترها استفاده می شوند. در محیط کشت تک لایه، پس از تلقیح سلول ها، رشد با استفاده از فرآیندی به نام مهار تماس تنظیم می شود.در طول مهار تماس، رشد سلول متوقف می‌شود تا تکثیر سلول‌های نرمال پس از تشکیل تک لایه متصل به سطح متوقف شود.
شکل 01: فرهنگ پایبند
سلول هایی که برای اتصال به بسترهای دیگر وابسته هستند، سلول های چسبنده نامیده می شوند. این سلول های چسبنده اغلب از بافت های اندامی مانند کلیه و غیره مشتق می شوند. این سلول ها بی حرکت هستند و به طور معمول به بافت همبند متصل می شوند. بنابراین، تمام این فاکتورهای رشد ضروری باید هنگام رشد این سلول ها در محیط کشت فراهم شوند. اهمیت کشت تک لایه این است که از شرایط طبیعی اولیه برای استقرار مناسب سلول تقلید می کند.
فرهنگ تعلیق چیست؟
یک کشت سوسپانسیون را می توان به عنوان نوعی از کشت تعریف کرد که در آن تکثیر تجمعات کوچک سلول ها یا سلول های منفرد به حالت تعلیق در یک محیط مایع که دائماً هم زده می شود انجام می شود.به عبارت دیگر، کشت سوسپانسیون به عنوان کشت سلولی کشت سوسپانسیون سلولی نیز شناخته می شود. این کشت به ایجاد کشت‌های تک سلولی کمک می‌کند که می‌توانند در طول بررسی سلول‌های گیاهی با توجه به پتانسیل‌ها و ویژگی‌های مختلف آنها مورد استفاده قرار گیرند. بررسی در مورد این جنبه می تواند برای درک روابط متقابل بین سلول ها و تأثیرات آنها در مورد ارگانیسم های چند سلولی مورد استفاده قرار گیرد.
در طول رشد اولیه گیاه، پینه ای تشکیل می شود که توده ای از سلول های تمایز نیافته است. این سطح رشد باعث ایجاد موانعی برای شناسایی رویدادهای سلولی در مراحل رشد و نمو گیاه می شود. کشت سوسپانسیون برای غلبه بر این وضعیت معرفی شد زیرا یک محیط کشت عالی برای ایجاد کشت های تک سلولی از توده های سلولی کوچک به دست آمده از کالوس فراهم کرد. این برای مطالعه جنبه های مختلف مورفولوژیکی و بیوشیمیایی در مراحل اولیه رشد گیاه مورد استفاده قرار گرفت.
شکل 02: کشت تعلیق
در زمینه به دست آوردن یک کشت سلولی ایده آل، روش معمولی این است که توده ای از کالوس را به یک محیط مایع هم زده منتقل کنید که در آن جرم به راحتی شکسته و پراکنده شود. توده های سلولی کوچک و سلول های منفرد. سپس این سلول ها به محیط دیگری منتقل می شوند. سلول های در حال رشد فعال پس از دو تا سه هفته به دست می آیند.
شباهت‌های بین کشت تک لایه و سوسپانسیون چیست؟
- هر دو کشت تک لایه و سوسپانسیون دو نوع کشت سلولی هستند که برای استقرار سلول استفاده می شوند
- هر دو نوع کشت تک لایه و سوسپانسیون در محیط کشت مناسب رشد می کنند.
- هر دو کشت تک لایه و سوسپانسیون معمولاً در کشت بافت استفاده می شوند.
تفاوت بین کشت تک لایه و سوسپانسیون چیست؟
تک لایه در مقابل فرهنگ تعلیق |
|
| کشت تک لایه یک کشت وابسته به لنگرگاه است که در آن سلول ها در حالی که به یک بستر متصل هستند رشد می کنند. | کشت سوسپانسیون یک کشت مستقل از لنگرگاه است که در آن تکثیر توده های کوچک سلولی یا تک سلولی به حالت تعلیق در یک محیط مایع که هم زده می شود انجام می شود. |
| الزامات | |
| کشت تک لایه نیاز به رگ تحت درمان با کشت بافت با عبور دوره ای دارد. | کشت سوسپانسیون را می توان با عروق بدون کشت بافتی به دست آورد. |
| محدودیت های رشد | |
| رشد کشت تک لایه توسط سطحی که مستقیماً بر عملکرد تأثیر می گذارد محدود می شود. | محدودیت رشد کشت سوسپانسیون با غلظت سلول ها در محیط صورت می گیرد. |
| تفکیک سلولی | |
| تجزیه سلولی به صورت مکانیکی یا آنزیمی در کشت تک لایه انجام می شود. | کشت سوسپانسیون به کمک آنزیم ها و وسایل مکانیکی برای تجزیه سلولی نیاز ندارد. |
| تجسم سلولی | |
| کشت تک لایه امکان تجسم آسان سلول ها را فراهم می کند. | دیدن سلول ها در کشت های سوسپانسیون سخت تر است. |
| عملکرد | |
| کشت تک لایه در زمینه های سیتولوژی، تحقیقات و برداشت مداوم محصول استفاده می شود. | کشت سوسپانسیون برای تولید عمده پروتئین ها، مطالعات تحقیقاتی و برداشت دسته ای استفاده می شود. |
خلاصه - تک لایه در مقابل فرهنگ تعلیق
کشت تک لایه و کشت سوسپانسیون دو کشت اصلی هستند که در کشت بافت مورد استفاده قرار می گیرند. فرهنگ تک لایه یک فرهنگ وابسته به لنگرگاه است. سلول ها در این کشت رشد می کنند و در آنجا به یک بستر موجود در کشت متصل می شوند. بسترها قبل از استفاده با دخالت منابع مختلف مانند پوشش های دو ظرفیتی و تخلیه کننده یون شارژ می شوند. کشت های سوسپانسیون، کشت های مستقل از لنگرگاه هستند که در آن سلول ها بدون کمک بستری برای اتصال رشد می کنند. این کشت به ایجاد کشت‌های تک سلولی کمک می‌کند که می‌توانند در طول بررسی سلول‌های گیاهی با توجه به پتانسیل‌ها و ویژگی‌های مختلف آنها مورد استفاده قرار گیرند.این تفاوت بین کشت تک لایه و کشت سوسپانسیون است.
