تفاوت کلیدی – فلوسیتومتری در مقابل FACS
در زمینه تئوری سلولی، سلول ها واحد ساختاری و عملکردی همه موجودات زنده هستند. مرتب سازی سلولی روشی است که برای جداسازی سلول های مختلف با توجه به ویژگی های فیزیولوژیکی و مورفولوژیکی استفاده می شود. آنها می توانند دارای ویژگی های درون سلولی یا خارج سلولی باشند. برهمکنش DNA، RNA و پروتئین ها به عنوان ویژگی های تعاملی درون سلولی در نظر گرفته می شوند در حالی که شکل، اندازه و پروتئین های سطحی مختلف به عنوان ویژگی های خارج سلولی در نظر گرفته می شوند. در علم امروزی، روش‌های مرتب‌سازی سلولی منجر به کمک به تحقیقات مختلف در مطالعات بیولوژیکی و همچنین در ایجاد اصول جدید از طریق تحقیقات پزشکی شده است.مرتب‌سازی سلولی بر روی روش‌های مختلفی انجام می‌شود که هم شامل روش‌های ابتدایی با تجهیزات کمتر و هم روش‌های فناوری پیشرفته با استفاده از ماشین‌آلات پیشرفته است. فلوسیتومتری، مرتب‌سازی سلول‌های فعال فلورسنت (FACS)، انتخاب سلول مغناطیسی و مرتب‌سازی تک سلولی روش‌های اصلی مورد استفاده هستند. فلوسیتومتری و FACS برای تمایز سلول ها بر اساس خواص نوری آنها توسعه یافته اند. FACS یک نوع تخصصی فلوسیتومتری است. فلوسیتومتری روشی است که در هنگام تجزیه و تحلیل جمعیت ناهمگن سلول ها با توجه به مولکول های سطح سلولی، اندازه و حجم مختلف استفاده می شود که امکان بررسی تک سلولی را فراهم می کند. FACS فرآیندی است که در آن نمونه‌ای از سلول‌ها بر اساس پراکندگی نور و ویژگی‌های فلورسانس آنها در دو یا چند ظرف دسته‌بندی می‌شوند. این تفاوت کلیدی بین فلوسیتومتری و FACS است.
فلوسایتومتری چیست؟
فلوسیتومتری روشی است که برای بررسی و تعیین بیان مولکول های درون سلولی و سطح سلول و برای تعریف و مشخص کردن انواع سلول های متمایز استفاده می شود.همچنین در تعیین حجم سلول و اندازه سلول و ارزیابی خلوص زیرجمعیت هایی که جدا شده اند استفاده می شود. این امکان ارزیابی چند پارامتری سلول های منفرد را تقریباً همزمان فراهم می کند. فلوسیتومتری برای اندازه گیری شدت فلورسانس که به دلیل آنتی بادی های نشاندار شده با فلورسنت تولید می شود استفاده می شود که به شناسایی پروتئین ها یا لیگاندهایی که به سلول های مرتبط متصل می شوند کمک می کند.
شکل 01: فلوسیتومتری
به طور کلی، فلوسیتومتری شامل سه سیستم فرعی است. آنها سیالات، الکترونیک و اپتیک هستند. در فلوسایتومتری، پنج جزء اصلی موجود است که در مرتب سازی سلولی استفاده می شود. آنها عبارتند از یک سلول جریان (جریان مایعی که برای انتقال آنها و تراز کردن سلول ها برای فرآیند سنجش نوری استفاده می شود)، یک سیستم اندازه گیری (می تواند از سیستم های مختلف از جمله لامپ های جیوه و زنون، خنک کننده با آب با قدرت بالا یا لیزرهای کم توان هوا خنک یا لیزرهای دیود)، یک ADC؛ سیستم مبدل آنالوگ به دیجیتال، سیستم تقویت و یک کامپیوتر برای آنالیز.اکتساب فرآیندی است که طی آن داده ها از نمونه ها با استفاده از فلوسایتومتر جمع آوری می شود. این فرآیند توسط رایانه ای که به فلوسیتومتر متصل است، انجام می شود. نرم افزار موجود در رایانه، اطلاعاتی را که از فلوسیتومتر به رایانه وارد می شود، تجزیه و تحلیل می کند. این نرم افزار همچنین قابلیت تنظیم پارامترهای آزمایش کنترل فلوسایتومتر را دارد.
FACS چیست؟
در زمینه فلوسایتومتری، مرتب سازی سلول های فعال شده با فلورسانس (FACS) روشی است که در تمایز و مرتب سازی نمونه ای از مخلوطی از سلول های بیولوژیکی استفاده می شود. سلول ها از دو یا چند ظرف جدا می شوند. روش مرتب سازی بر اساس ویژگی های فیزیکی سلول است که شامل پراکندگی نور و ویژگی های فلورسانس سلول است. این یک تکنیک علمی مهم است که می توان از آن برای به دست آوردن نتایج کمی و کیفی قابل اعتماد سیگنال های فلورسانس که از هر سلول ساطع می شود، استفاده کرد.در طول FACS، در ابتدا، مخلوط از پیش به دست آمده از سلول ها. یک سوسپانسیون به مرکز جریان باریکی از مایع که به سرعت در حال جریان است هدایت می شود. جریان مایع به منظور جداسازی سلول های سوسپانسیون بر اساس قطر هر سلول طراحی شده است. یک مکانیسم ارتعاش به جریان تعلیق اعمال می شود که منجر به تشکیل قطرات منفرد می شود.
شکل 02: FACS
سیستم به منظور ایجاد یک قطره واحد با یک سلول کالیبره شده است. درست قبل از تشکیل قطرات، سوسپانسیون جریان در امتداد دستگاه اندازه گیری فلورسانس حرکت می کند که مشخصه فلورسانس هر سلول را تشخیص می دهد. در نقطه تشکیل قطرات، یک حلقه شارژ الکتریکی قرار می گیرد که قبل از اندازه گیری شدت فلورسانس، باری به حلقه القا می شود.هنگامی که قطرات از جریان تعلیق تشکیل می شوند، باری در داخل قطرات به دام می افتد که سپس وارد یک سیستم انحراف الکترواستاتیک می شود. با توجه به شارژ، سیستم قطرات را به ظروف مختلف هدایت می کند. روش اعمال شارژ با توجه به سیستم های مختلف مورد استفاده در FACS متفاوت است. تجهیزات مورد استفاده در FACS به عنوان یک مرتب کننده سلول فعال شده با فلورسانس شناخته می شود.
شباهت بین فلوسایتومتری و FACS چیست؟
فلوسیتومتری و FACS برای تمایز سلول ها بر اساس ویژگی های نوری آنها توسعه یافته اند
تفاوت بین فلوسایتومتری و FACS چیست؟
فلوسایتومتری در مقابل FACS |
|
| فلوسیتومتری روشی است که در هنگام تجزیه و تحلیل جمعیت ناهمگن سلول ها بر اساس مولکول های سطح سلولی، اندازه و حجم مختلف استفاده می شود که امکان بررسی تک سلولی را فراهم می کند. | FACS فرآیندی است که طی آن مخلوط نمونه ای از سلول ها بر اساس پراکندگی نور و ویژگی های فلورسانس آنها در دو یا چند ظرف دسته بندی می شود. |
خلاصه - فلوسیتومتری در مقابل FACS
سلول واحد اصلی ساختاری و عملکردی همه موجودات زنده است. مرتب‌سازی سلولی فرآیندی است که طی آن سلول‌ها بر اساس ویژگی‌های درون سلولی و خارج سلولی آنها جداسازی و به دسته‌های مختلف تفکیک می‌شوند. فلوسیتومتری و FACS دو روش مهم در مرتب سازی سلولی هستند. هر دو فرآیند برای تمایز سلول ها با توجه به ویژگی های نوری آنها توسعه یافته اند. فلوسیتومتری روشی است که در هنگام تجزیه و تحلیل جمعیت ناهمگن سلول ها با توجه به مولکول های سطح سلولی، اندازه و حجم مختلف استفاده می شود که امکان بررسی تک سلولی را فراهم می کند. FACS فرآیندی است که در آن نمونه‌ای از سلول‌ها بر اساس پراکندگی نور و ویژگی‌های فلورسانس آنها در دو یا چند ظرف دسته‌بندی می‌شوند.این تفاوت بین فلوسایتومتری و FACS است.
دانلود نسخه PDF Flow Cytometry vs FACS
می توانید نسخه PDF این مقاله را دانلود کنید و طبق یادداشت نقل قول برای اهداف آفلاین از آن استفاده کنید. لطفاً نسخه PDF را از اینجا دانلود کنید تفاوت بین فلوسایتومتری و FACS
