تفاوت اصلی بین pBR322 و pUC19 این است که pBR322 یک بردار پلاسمیدی است که طول آن 4361 جفت باز است، در حالی که pUC19 یک بردار پلاسمید است که طول آن 2686 جفت باز است.
ناقل شبیه سازی قطعه کوچکی از DNA است که می تواند به طور پایدار در یک موجود زنده نگهداری شود. همچنین قطعه کوچکی از DNA است که می توان یک قطعه DNA خارجی را برای اهداف شبیه سازی در آن وارد کرد. یک وکتور دارای ویژگی‌های مهمی است که امکان درج راحت یک قطعه DNA خارجی را در ناقل‌ها فراهم می‌کند، مانند مکان‌های محدود، یک نشانگر قابل انتخاب، ژن گزارشگر و عنصر بیان. شبیه سازی ابتدا با استفاده از E انجام شد.کولی. ناقل های شبیه سازی برای E. coli شامل پلاسمیدها، باکتریوفاژها، کیهان ها و کروموزوم های مصنوعی باکتریایی (BAC) می باشد. متداول ترین وکتورهای مورد استفاده پلاسمیدهای دستکاری شده ژنتیکی هستند. pBR322 و pUC19 دو نوع ناقل پلاسمیدی هستند.
pBR322 چیست؟
pBR322 یک ناقل پلاسمیدی است. این یکی از اولین ناقل های شبیه سازی پرکاربرد برای E. coli است. این وکتور اولین بار در سال 1977 در آزمایشگاه هربرت بویر در دانشگاه کالیفرنیا در سانفرانسیسکو ایجاد شد. این یک DNA دو رشته ای دایره ای است که طول آن 4361 جفت باز است.
شکل 01: pBR322
این ناقل پلاسمیدی دارای ویژگی های خاصی است. به طور معمول، دارای دو ژن مقاومت به آنتی بیوتیک است: ژن bla کد کننده پروتئین مقاومت به آمپی سیلین (AmpR) و ژن tetA کدکننده مقاومت به تتراسایکلین (TetR) پروتئینعلاوه بر این، منشا تکثیر pMB1 را در خود دارد. این ناقل پلاسمیدی همچنین دارای ژن rop است که محدود کننده شماره کپی پلاسمید را کد می کند. علاوه بر این، این ناقل دارای مکان های محدود کننده منحصر به فردی برای بیش از 40 آنزیم محدود کننده است. یازده مورد از آن چهل سایت محدودیت در ژن TetR قرار دارد. در پروموتر ژن TetR دو مکان محدود برای آنزیم های محدود HindIII و ClaI وجود دارد. علاوه بر این، شش مکان بسیار مهم محدودیت در ژن AmpR وجود دارد. pBR322 یک وکتور شبیه سازی با تعداد کم کپی است. تقریباً 20 نسخه پلاسمید در هر سلول باکتری فراهم می کند. وزن مولکولی بردار 2.83×106 دالتون است.
pUC19 چیست؟
pUC19 یک بردار پلاسمیدی است که 2686 جفت باز طول دارد. این یکی از سری ناقل های پلاسمید است که توسط یواخیم مسینگ و همکارانش ایجاد شده است. کار اولیه روی این سری پلاسمید در دانشگاه کالیفرنیا انجام شد. این یک DNA دایره‌ای دو رشته‌ای است.
شکل 02: pUC19
این ناقل پلاسمیدی همچنین دارای ویژگی های مهمی است. دارای یک قطعه N انتهایی ژن β گلاکتوزیداز (lacz) است. همچنین دارای یک منطقه شبیه سازی چندگانه (MCS) است. این ناحیه به کدون های 6 و 7 ژن lacz تقسیم می شود. منطقه MCS بسیاری از مکان‌های محدودکننده اندونوکلئازهای محدود را فراهم می‌کند. علاوه بر ژن β گلاکتوزیداز، pUC19 یک ژن مقاومت به آمپی سیلین را نیز رمزگذاری می کند (AmpR). علاوه بر این، منشا همانندسازی از پلاسمید pMB1 مشتق شده است. اگرچه pUC19 اندازه کوچکی دارد، اما تعداد کپی بالایی دارد (500-700 کپی در هر سلول باکتری). وزن مولکولی این ناقل پلاسمیدی 1.75×106 دالتون است.
شباهت‌های بین pBR322 و pUC19 چیست؟
- pBR322 و pUC19 دو نوع ناقل پلاسمیدی هستند.
- آنها ناقل شبیه سازی محبوب برای کولی هستند.
- هر دو ناقل پلاسمید دارای منشأ تکثیر پلاسمید pMB1 یکسان هستند.
- این بردارها دارای چندین سایت محدودیت هستند.
- هر دو ناقل پلاسمید دارای یک ژن مقاومت به آمپی سیلین به عنوان یک نشانگر قابل انتخاب هستند.
تفاوت بین pBR322 و pUC19 چیست؟
pBR322 یک بردار پلاسمیدی با طول 4361 جفت باز است، در حالی که pUC19 یک بردار پلاسمیدی است که طول آن 2686 جفت باز است. بنابراین، این تفاوت اصلی بین pBR322 و pUC19 است. علاوه بر این، pBR322 یک بردار پلاسمید با تعداد کپی کم است، در حالی که pUC19 یک بردار پلاسمیدی با تعداد کپی بالا است.
اینفوگرافیک زیر تفاوت بین pBR322 و pUC19 را به صورت جدولی برای مقایسه کنار هم نشان می دهد.
خلاصه - pBR322 در مقابل pUC19
رایج ترین ناقل های شبیه سازی شده برای E.coli پلاسمیدهای دستکاری شده ژنتیکی هستند.pBR322 و pUC19 دو نوع ناقل پلاسمیدی هستند. pBR322 یک بردار پلاسمیدی است که طول آن 4361 جفت باز است، در حالی که pUC19 یک بردار پلاسمیدی است که طول آن 2686 جفت باز است. بنابراین، این تفاوت اصلی بین pBR322 و pUC19 است.
