تفاوت کلیدی بین سنجش میکرونوکلئوس و ستاره دنباله دار این است که سنجش میکرونوکلئوس برای بررسی آسیب کروموزومی در نتیجه قرار گرفتن در معرض جهش زا مهم است، در حالی که سنجش ستاره دنباله دار برای تشخیص آسیب DNA اولیه در سلول های فردی مهم است.
سنجش سمیت ژنتیکی به ارزیابی احتمال جهش ها و ناهنجاری های کروموزومی کمک می کند. ژنوتوکسین ها شامل مواد شیمیایی و تشعشعات هستند. مواد سرطان زا، جهش زا و تراتوژن دسته های اصلی ژنوتوکسین ها هستند. آنها باعث آسیب های مختلفی مانند جهش نقطه ای، حذف، شکست های تک و دو رشته ای، انحرافات کروموزومی، تشکیل ریزهسته ها، ترمیم DNA و فعل و انفعالات چرخه سلولی می شوند.چنین شرایطی ممکن است منجر به طیف گسترده ای از بیماری ها شود و سنجش های سمیت ژنی از آسیب احتمالی این شرایط جلوگیری می کند. سنجش میکرونوکلئوس و سنجش دنباله‌دار دو تکنیک تحت آزمایش‌های سمیت ژنی هستند.
آزمایش میکرونوکلئوس چیست؟
سنجش میکرونوکلئوس سنجشی برای ارزیابی آسیب کروموزومی در نتیجه قرار گرفتن در معرض جهش‌زا است. در غربالگری مواد شیمیایی که باعث تشکیل دوک و ریزهسته می شوند مهم است. سنجش میکرونوکلئوس اطلاعاتی در مورد پایداری مواد شیمیایی در هنگام تداخل با ساختار و عملکرد کروموزوم ارائه می دهد. تست بسیاری از مواد سرطان زا در سنجش میکرونوکلئوس مثبت است. فرآیند سنجش شامل یک درمان شیمیایی و اندازه‌گیری فرکانس سلول‌های ریزهسته‌ای است. اگر افزایش غیرطبیعی در تعداد سلول های ریز هسته وجود داشته باشد، نتیجه می گیرد که این ماده شیمیایی باعث آسیب کروموزومی می شود.
آزمایش میکرونوکلئوس معمولاً روی سلول‌های در حال تقسیم فعال انجام می‌شود. بنابراین، گلبول های قرمز و سلول های بنیادی مغز استخوان که از طریق تقسیم سلولی تولید می شوند، کاندیدای ایده آل برای چنین سنجش هایی هستند.آنها یک گردش ثابت و سریع را تجربه می کنند. از آنجایی که گلبول‌های قرمز هسته واقعی ندارند، سلول‌های ریز هسته‌دار را در پایان سنجش بیشتر قابل مشاهده می‌کند.
شکل 01: مشاهده سنجش میکرونوکلئوس
سنجش‌های میکرونوکلئوس اقتصادی، سریع‌تر، راحت‌تر و به مهارت‌های کمتری برای انجام نیاز دارند. آنها انحرافات کروموزومی را به سرعت به شیوه ای قابل اعتماد منعکس می کنند و برای ارزیابی سریع آسیب های کروموزومی بسیار مفید هستند. یک نوع خاص و همه کاره از سنجش میکرونوکلئوس، سنجش سیتوکینز بلوک میکرونوکلئوس سیتوم (CBMNcyt) است. این روش ترجیحی برای اندازه گیری آسیب کروموزومی و بی ثباتی در سلول ها است. با این حال، مشکل اصلی استفاده از روش میکرونوکلئوس این است که قادر به تعیین انواع مختلف انحرافات کروموزومی نیست و این روش بر میزان میتوزی و نسبت مرگ سلولی تأثیر می گذارد و باعث تغییر نتایج می شود.
سنجش دنباله دار چیست؟
سنجش ستاره دنباله دار، که به عنوان روش تک ژل الکتروفورز نیز شناخته می شود، یک تکنیک ساده و حساس برای تشخیص آسیب DNA است. این تجزیه شکست های DNA در سلول های یوکاریوتی را اندازه گیری می کند و یک تکنیک استاندارد برای پایش زیستی و آزمایش سمیت ژنی است.
سنجش دنباله دار در کپسوله کردن سلول ها در سوسپانسیون های آگارز با نقطه ذوب پایین، لیز سلول ها در شرایط خنثی یا قلیایی، و الکتروفورز سلول های لیز شده معلق نقش دارد. در طی فرآیند کپسوله‌سازی، سلول‌ها در آگارز مذاب با نقطه ذوب پایین معلق می‌شوند و آگارز ماتریکسی از الیاف کربوهیدرات را تشکیل می‌دهد تا آنها را در جای خود محکم کند. آگارز از نظر اسمزی خنثی است. بنابراین، محلول‌ها را قادر می‌سازد تا از طریق ژل نفوذ کرده و بدون ایجاد مزاحمت و جابه‌جایی روی سلول‌ها تأثیر بگذارند. محلول لیز یک محلول نمک آبی با غلظت بالا و یک ماده شوینده است. این نمک پروتئین ها و الگوهای پیوند درون سلول را مختل می کند در حالی که محتوای RNA سلول را مختل می کند.سلول ها از بین می روند و تمام پروتئین ها، RNA، ترکیبات سیتوپلاسمی و نوکلئوپلاسمی، مختل می شوند و در ماتریکس آگاروز منتشر می شوند و DNA را ترک می کنند.
شکل 02: سنجش دنباله دار
محلول الکتروفورز محلول قلیایی است که در آن مارپیچ دوگانه DNA دناتوره می شود و نوکلوئید تک رشته ای می شود. در طی این فرآیند، یک میدان الکتریکی برای تجزیه و تحلیل تصاویر اعمال می شود. تجزیه و تحلیل تصویر، شدت کلی فلورسانس را برای DNA و نوکلوئید اندازه‌گیری می‌کند و این دو را با هم مقایسه می‌کند. ساختار کلی شبیه یک دنباله‌دار با سر دایره‌ای است که مربوط به DNA سالم باقی مانده و دنباله‌ای برای DNA آسیب‌دیده است. هر چه دم به دلیل سیگنال‌های قوی‌تر روشن‌تر و بلندتر باشد، سطح آسیب بیشتر می‌شود.
شباهت‌های بین میکرونوکلئوس و سنجش دنباله‌دار چیست؟
- میکرونوکلئوس و سنجش دنباله دار مقرون به صرفه تر، سریع تر، راحت تر هستند و به مهارت های کمتری نیاز دارند.
- آنها عمدتاً روی DNA انجام می شوند.
- هر دو سنجش به ارزیابی جهش ها و ناهنجاری های کروموزومی کمک می کنند.
- علاوه بر این، هر دو تکنیک از مواد شیمیایی برای انجام این روش استفاده می کنند.
تفاوت بین سنجش میکرونوکلئوس و ستاره دنباله دار چیست؟
سنجش میکرونوکلئوس در بررسی آسیب کروموزومی در نتیجه قرار گرفتن در معرض جهش‌زا مهم است، در حالی که سنجش ستاره دنباله دار در تشخیص آسیب اولیه DNA در سلول‌های فردی مهم است. بنابراین، این تفاوت کلیدی بین سنجش میکرونوکلئوس و ستاره دنباله دار است. همچنین، سنجش میکرونوکلئوس برای تشخیص clastogenicity و aneugenicity به خوبی تثبیت شده است. سنجش ستاره دنباله دار به عنوان یک تست سمیت ژنی برای تشخیص آسیب اولیه DNA در سلول ها استفاده می شود. علاوه بر این، یک سنجش میکرونوکلئوس اطلاعاتی در مورد پایداری مواد شیمیایی ارائه می‌کند، در حالی که یک سنجش دنباله‌دار یک الکتروفورز ژل تک سلولی است.
اینفوگرافیک زیر تفاوت‌های بین سنجش میکرونوکلئوس و دنباله‌دار را به شکل جدولی برای مقایسه کنار هم نشان می‌دهد.
خلاصه - سنجش میکرونوکلئوس در مقابل ستاره دنباله دار
سنجش سمیت ژنتیکی به ارزیابی احتمال جهش ها و ناهنجاری های کروموزومی کمک می کند. سنجش میکرونوکلئوس و سنجش دنباله‌دار دو تکنیک تحت آزمایش‌های سمیت ژنی هستند. سنجش میکرونوکلئوس آسیب کروموزومی را در نتیجه قرار گرفتن در معرض جهش‌زا ارزیابی می‌کند. سنجش دنباله دار یک تکنیک ساده و حساس برای تشخیص آسیب DNA است. بنابراین، این تفاوت کلیدی بین سنجش میکرونوکلئوس و ستاره دنباله دار است. سنجش میکرونوکلئوس در غربالگری مواد شیمیایی که باعث تشکیل دوک و میکرونوکلئوس می شوند، مهم است. سنجش Comet در کپسوله کردن سلول‌ها در سوسپانسیون‌های آگارز با نقطه ذوب پایین، لیز سلول‌ها در شرایط خنثی یا قلیایی، و الکتروفورز سلول‌های لیز شده معلق نقش دارد.
