تفاوت کلیدی - ترانسفورمنت ها در مقابل نوترکیب ها
بازترکیب و تبدیل دو مرحله حیاتی در مهندسی ژنتیک هستند که در آن ویژگی‌های یک موجود زنده عمداً با دستکاری مواد ژنتیکی آن اصلاح می‌شود. نوترکیبی فرآیندی است که در آن DNA خارجی در ژنوم ناقل ترکیب می شود و مولکول DNA نوترکیب تشکیل می شود. تبدیل مرحله بعدی است که در آن مولکول نوترکیب وارد ارگانیسم میزبان می شود. سلول میزبان یا ارگانیسم بیان مولکول نوترکیب را تسهیل می کند. تفاوت اصلی بین ترانسفورماتورها و نوترکیب ها در این است که ترانسفورماتورها سلول ها یا موجوداتی هستند که مولکول نوترکیب را در داخل می گیرند و بیان را تسهیل می کنند در حالی که نوترکیب ها بردارهایی هستند که اجازه می دهند DNA خارجی در ژنوم آن وارد شود و برای بیان به ترانسفورماتور میزبان منتقل شود.
Transformants چیست؟
ترانسفورمنت ها سلول ها یا موجوداتی هستند که در آنها DNA نوترکیب برای بیان جذب می شود. باکتری ها معمولاً به عنوان ارگانیسم های میزبان در مهندسی ژنتیک مورد استفاده قرار می گیرند زیرا رشد، تکثیر و نگهداری آنها در شرایط آزمایشگاهی آسان است و فرآیند تبدیل در مقایسه با سایر موجودات آسان است. محبوب ترین باکتری میزبان مورد استفاده در مهندسی ژنتیک، باکتری E coli است.
در طول فرآیند تبدیل، سلول های میزبان وادار می شوند تا نوترکیب ها را جذب کنند. با این حال، برخی از سلول های میزبان مولکول های نوترکیب را نمی گیرند. آنها به عنوان nontransformants شناخته می شوند و سلول هایی که حاوی مولکول های DNA نوترکیب در داخل هستند به عنوان Transformants شناخته می شوند. انتخاب ترانسفورمنت ها از غیر تبدیل با استفاده از نشانگرهای قابل انتخاب در زیست شناسی مولکولی انجام می شود. نشانگرهای قابل انتخاب همراه با درج DNA در ژنوم ناقل قرار داده می شوند. نشانگرهای انتخابی که معمولاً مورد استفاده قرار می گیرند، ژن های مقاوم به آنتی بیوتیک هستند.ژن های نشانگر تمایز ترانسفورماتورها را تسهیل می کنند و این روند را ادامه می دهند. پس از فرآیند تبدیل، باکتری در محیط حاوی آنتی بیوتیک رشد می کند. فقط ترانسفورماتورها قادر به رشد در آن محیط هستند زیرا آنها دارای نوترکیب های داخل هستند.
هنگامی که مولکول DNA نوترکیب در داخل ارگانیسم میزبان تبدیل شد، DNA خارجی می تواند در ژنوم سلول میزبان ادغام شود یا در سیتوپلاسم غیر یکپارچه باقی بماند. با این حال، بیان و تکثیر DNA خارجی در ارگانیسم میزبان رخ می دهد و نتیجه مطلوب را از این فرآیند ایجاد می کند.
نوترکیب چیست؟
نوترکیب ارگانیسم یا سلولی است که دارای ژنوم نوترکیب حاوی DNA خارجی است. نوترکیب ها نتیجه فرآیند مهندسی ژنتیک هستند.آنها به طور مصنوعی در شرایط آزمایشگاهی با قرار دادن ژن های مورد نظر و اصلاح ژنوم ساخته می شوند. اغلب پلاسمیدهای باکتریایی و باکتریوفاژها به عنوان نوترکیب در مهندسی ژنتیک عمل می کنند. واهی از DNA های مختلف دارد. مولکول DNA نوترکیب DNA خارجی را به ارگانیسم میزبان می برد و آن را بیان و محصول مورد نظر را تشکیل می دهد.
مولکولهای نوترکیب با استفاده از اندونوکلئازهای محدود کننده و لیگازهای DNA ساخته می شوند. قطعه DNA مورد نظر از ارگانیسم اصلی جدا شده و در ناقل قرار داده می شود تا نوترکیب برای تبدیل شود. برش ژن مورد نظر و باز کردن ارگانیسم ناقل باید با استفاده از همان آنزیم محدود کننده انجام شود تا انتهای چسبنده سازگار ایجاد شود تا آنها را به یکدیگر متصل کند. هنگامی که DNA خارجی در ژنوم ناقل گنجانده می شود، به عنوان مولکول DNA نوترکیب یا نوترکیب شناخته می شود.
شکل 02: DNA نوترکیب
تفاوت بین Transformants و Recombinants چیست؟
Transformants vs Recombinants |
|
| ترانسفورمنت ها سلول هایی هستند که دارای مولکول DNA نوترکیب در داخل هستند. | نوترکیب ها مولکول های حاملی هستند که دارای DNA خارجی در ژنوم خود هستند. |
| بیان DNA خارجی | |
| آنها سلول های میزبانی هستند که قادر به بیان DNA نوترکیب هستند. | آنها باید بتوانند در ارگانیسم میزبان خود تکثیر شوند. |
| انتخاب | |
| سلول هایی که به راحتی رشد و تکثیر می شوند به عنوان سلول میزبان انتخاب می شوند. | آنها باید به راحتی قابل استخراج باشند و باید دارای نشانگرهای قابل انتخاب باشند. |
خلاصه - Transformants vs Recombinants
ترانسفورمنت ها سلول ها یا موجوداتی هستند که مولکول های DNA نوترکیب درون خود دارند. نوترکیب ها ارگانیسم ها یا سلول هایی هستند که تحت نوترکیبی ژنتیکی قرار گرفته و دارای DNA خارجی در ژنوم خود هستند. سلول های باکتریایی اغلب به عنوان سلول های میزبان برای تبدیل و پلاسمیدها و باکتریوفاژها اغلب به عنوان ناقل در فناوری DNA نوترکیب استفاده می شوند. این تفاوت بین تبدیل و نوترکیب است.
