تفاوت بین CFU و MPN

2024 نویسنده: Alex Aldridge | [email protected]. آخرین اصلاح شده: 2023-12-17 13:37

تفاوت کلیدی – CFU در مقابل MPN

واحد تشکیل کلونی (CFU) و عدد محتمل (MPN) دو روشی هستند که برای شمارش میکروارگانیسم‌ها در نمونه‌ها استفاده می‌شوند. هر دو پارامتر برای تشخیص کیفیت آب و باکتری های شاخص مدفوع در نمونه های آب استفاده می شود. واحد تشکیل کلونی معیاری است که برای شمارش تعداد سلول‌های باکتریایی یا سلول‌های قارچی زنده در حجم یا وزن خاص یک نمونه مورد استفاده قرار می‌گیرد. واحد استاندارد این پارامتر CFU/ml یا CFU/g است. محتمل ترین عدد واحد دیگری است که برای اندازه گیری تعداد سلول های باکتریایی زنده در یک نمونه مایع استفاده می شود. تفاوت اصلی بین CFU و MPN این است که CFU از کلنی های باکتریایی و قارچی در حال رشد در یک صفحه جامد آگار محاسبه می شود در حالی که MPN از باکتری های زنده در حال رشد در یک محیط مایع محاسبه می شود.

CFU چیست؟

واحد تشکیل کلونی (CFU) پارامتری است که تعداد سلول‌های باکتریایی یا قارچی زنده را در یک نمونه مشخص اندازه‌گیری می‌کند. روشی که واحدهای تشکیل دهنده کلنی را شمارش می کند به عنوان شمارش استاندارد صفحه نامیده می شود. کلنی های زنده ای که روی صفحات آگار ظاهر می شوند به صورت CFU در هر میلی لیتر (واحد تشکیل کلنی در هر میلی لیتر) نمونه برای مایعات یا CFU به ازای هر 1 گرم (واحد تشکیل کلنی در هر گرم) از نمونه برای مواد جامد بیان می شوند.

دو روش رایج برای اندازه گیری CFU در یک نمونه وجود دارد. آنها به روش صفحه پخش و به روش بشقاب ریختن می باشند. این دو روش توسط تکنیکی به نام رقیق سازی سریال پشتیبانی می شوند. نمونه های رقیق شده به صورت سریال امکان به دست آوردن تعداد قابل شمارش کلنی روی سطح آگار را می دهد. حجم مشخصی از نمونه را می توان روی سطح یک صفحه آگار پخش کرد یا با آگار مخلوط کرد و روی صفحه ریخت. سپس پلیت انکوبه می شود و کلنی های ایجاد شده شمارش می شوند. تعداد کلنی ها به تعداد میکروارگانیسم های موجود در نمونه اصلی مربوط می شود.صفحاتی که تعداد زیادی کلنی یا تعداد بسیار کمی از کلنی ها را نشان می دهند از شمارش حذف می شوند زیرا ممکن است نتایج از نظر آماری در آن صفحات دقیق نباشد. از نظر آماری، بهترین محدوده 30 تا 300 کلنی در یک صفحه آگار است. از این رو، صفحات صحیح باید برای شمارش دقیق انتخاب شوند. رقت سریال برای عملکرد فوق انجام می شود.

هنگامی که تعداد کلنی های زنده روی پلیت ها را بشمارید، CFU/ml را می توان با استفاده از معادله زیر محاسبه کرد.

CFU در هر میلی لیتر نمونه اصلی=تعداد کلنی ها در یک صفحه X ضریب رقت

ضریب رقت=(1/رقیق شدن صفحه)

برای مثال، اگر در صفحه رقت 10^{-4 149 کلنی دریافت کنید، تعداد باکتری ها در 1 میلی لیتر از نمونه اصلی را می توان به صورت زیر محاسبه کرد.:}

CFU/ml=(149) x (1/10^-4)

=149 × 10^{4 یا 1490000}

=1. 49 x 10⁶

شکل 01: واحد تشکیل کلنی

MPN چیست؟

محتمل ترین عدد، اندازه گیری جایگزین برای CFU/ml است. MPN همچنین سلول های زنده را در یک نمونه مایع تخمین می زند. این ارگانیسم‌های در حال رشد در یک کشت مایع را شمارش می‌کند و یک تکنیک عمدتاً باکتری‌شناسی است. این روش به ویژه برای نمونه هایی که حاوی غلظت کم سلول های باکتریایی هستند مفید است. به عنوان مثال، شیر، آب آشامیدنی و غیره. مقدار MPN برای 100 میلی لیتر حجم بیان می شود. MPN بر یک روش آماری مبتنی بر نظریه احتمال متکی است. جداول آماری برای یافتن مقادیر MPN در هر 100 میلی لیتر از نمونه طراحی شده است. این جداول نتایج را در حدود 95% اطمینان نشان می دهد.

مقدار MPN پس از انجام تکنیکی به نام روش تخمیر چند لوله ای محاسبه می شود. سه مجموعه از لوله های حاوی محیط کشت مناسب با سه حجم مختلف نمونه مانند 10 میلی لیتر، 1 میلی لیتر و 0 تلقیح می شوند.1 میلی لیتر و برای رشد انکوبه می شود. پس از دوره جوجه کشی، لوله ها برای وجود یا عدم وجود رشد نمره گذاری می شوند + (مثبت) یا - (منفی). سپس الگوی نتایج مثبت و منفی با جدول MPN احتمالات آماری برای تخمین تعداد میکروارگانیسم ها مقایسه می شود. سپس مقدار MPN برای 100 میلی لیتر از نمونه داده می شود. MPN به طور گسترده برای شناسایی باکتری های کلیفرم موجود در نمونه های آب استفاده می شود.

شکل 02: جدول MPN

تفاوت بین CFU و MPN چیست؟

CFU در مقابل MPN
CFU معیاری است که برای بیان تعداد کلنی های باکتریایی یا قارچی زنده در یک نمونه معین استفاده می شود.	MPN یک اندازه گیری جایگزین برای CFU است و تعداد سلول های باکتریایی زنده را در یک نمونه مایع اندازه گیری می کند.
واحد
CFU/ml یا CFU/g	MPN/100 ml
محاسبه
CFU با شمارش تعداد کلنی‌های رشد یافته در صفحات آگار محاسبه می‌شود.	MPN با مقایسه الگوهای مثبت و منفی لوله ها با جدول آماری MPN محاسبه می شود.
تکنیک رقیق سازی سریال
رقت‌سازی سریال قبل از قرار دادن نمونه‌ها روی صفحات آگار انجام می‌شود.	رقت سریال معمولاً وقتی MPN محاسبه می شود انجام نمی شود
روش
روش صفحه پخش و روش بشقاب ریختن دو نوع روشی هستند که برای به دست آوردن CFU انجام می شوند.	تخمیر چند لوله ای روشی است که برای به دست آوردن مقدار MPN انجام می شود.

خلاصه - CFU در مقابل MPN

اندازه گیری رشد میکروبی به دلایل زیادی لازم است. در کارخانه های فرآوری مواد غذایی، اندازه گیری سطح و نوع میکروارگانیسم ها در مواد غذایی ضروری است. در صنایع غذایی و پزشکی، لازم است اطمینان حاصل شود که درمان های استریلیزاسیون به طور موثر اعمال می شود. در تصفیه خانه های فاضلاب، شمارش میکروبی به صورت روتین الزامی است. هنگام بهینه‌سازی روش در زیست‌شناسی مولکولی، اندازه‌گیری تعداد کلنی‌ها روی صفحات ضروری است. از این رو، روش های مختلف شمارش و اندازه گیری رشد موجود است. CFU و MPN دو روش از این قبیل هستند که به طور گسترده در زمینه های مختلف مورد استفاده قرار می گیرند. CFU اندازه گیری تعداد کلنی های باکتریایی و قارچی زنده موجود در یک نمونه معین است. با استفاده از روش شمارش پلاک استاندارد یا روش شمارش صفحه زنده محاسبه می شود. MPN معیار دیگری است که تعداد سلول های باکتری موجود در حجم معینی از نمونه مایع را بیان می کند.با استفاده از روش تخمیر چند لوله ای و جدول MPN محاسبه می شود. این تفاوت بین CFU و MPN است.

دانلود نسخه PDF CFU در مقابل MPN

می توانید نسخه PDF این مقاله را دانلود کنید و طبق یادداشت های نقل قول برای اهداف آفلاین از آن استفاده کنید. لطفاً نسخه PDF را از اینجا دانلود کنید تفاوت بین CFU و MPN.