تفاوت کلیدی – RPMI در مقابل DMEM
بیشتر مطالعات تحقیقاتی شامل کشت سلول های حیوانی است و بنابراین، این مطالعات نیاز به نگهداری رده های سلولی حیوانی در شرایط رشد ویژه دارند. کشت سلول های حیوانی به طور گسترده در مطالعات فارماکولوژیک برای شناسایی متابولیسم دارو، در تشخیص بیماری ها و در تحقیقات سرطان انجام می شود. محیط کشت سلولی یکی از جنبه های مهم کشت سلولی حیوانی است. محیط کشت عقاب اصلاح شده Dulbecco (DMEM) و محیط کشت یادبود Roswell Park (RPMI) دو محیط کشت مورد استفاده در کشت سلول های حیوانی هستند. RPMI محیطی است که به طور گسترده برای کشت سلول های پستانداران در کشت سوسپانسیون استفاده می شود. DMEM یک نوع اصلاح شده از محیط پایه است، با افزایش غلظت اسید آمینه و ویتامین تا چهار برابر. DMEM در کشت سلول ها در کشت های چسبنده استفاده می شود. تفاوت اصلی این دو رسانه در نوع فرهنگ رسانه است. RPMI در کشت های سوسپانسیون استفاده می شود، در حالی که DMEM برای کشت سلول های چسبنده استفاده می شود.
RPMI چیست؟
RPMI یا Roswell Park Memorial Institute با نام RPMI 1640 نیز شناخته می شود. نام رسانه توسط موسسه ای که رسانه در آن کشف شد مشتق شده است. این محیط معمولاً در کشت سلولی حیوانی به ویژه برای رشد سلول های پستانداران استفاده می شود. آنها در ابتدا برای رشد لنفوسیت های انسانی ساخته شدند.
مواد زیر در RPMI گنجانده شده است.
- گلوکز
- نشانگر pH (قرمز فنل)\
- نمک (کلرید سدیم، بی کربنات سدیم، دی سدیم فسفات، کلرید پتاسیم، سولفات منیزیم و نیترات کلسیم)
- اسیدهای آمینه
- ویتامین ها (آی-اینوزیتول، کولین کلرید، اسید پارا آمینوبنزوئیک، اسید فولیک، نیکوتین آمید، پیریدوکسین هیدروکلراید، تیامین هیدروکلراید، پانتوتنات کلسیم، بیوتین و ریبوفلاوین، سیانوکوبالامین)
ویژگی خاص RPMI افزایش غلظت فسفات در محیط است. RPMI در اتمسفر 5% دی اکسید کربن استفاده می شود. این امر حداکثر و بهینه ترین شرایط را برای رشد سلولی فراهم می کند. pH محیط توسط سیستم بافر بی کربنات در 8.0 حفظ می شود.
شکل 01: کشت سلولی روی ظرف پتری
کاربردهای RPMI در کشت سلولی
- کشت لنفوسیت های T و B انسان، سلول های مغز استخوان و هیبریدوم.
- برای مطالعه سلول های نئوپلاستیک انسانی استفاده می شود.
DMEM چیست؟
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) یک محیط اصلاح شده است که به صورت تجاری تهیه می شود. بافت اصلی پودر متوسط زرد است. در DMEM، غلظت ویتامین تا چهار برابر افزایش می یابد و در نتیجه محتوای مواد مغذی در محیط افزایش می یابد.
DMEM همچنین با افزودن نمک های بیشتری مانند نیترات آهن، پیروات سدیم و برخی از اسیدهای آمینه غیر ضروری مانند سرین و گلیسین اصلاح می شود. فرمول گلوکز در محیط نیز تغییر می کند. فرمول اولیه از 1000 میلی گرم در لیتر گلوکز تشکیل شده است، در حالی که در DMEM، غلظت تا 4500 میلی گرم در لیتر افزایش می یابد. DMEM همچنین نیاز به مکمل یک محیط سرم دارد زیرا یک محیط کامل نیست. اغلب، DMEM با سرم جنین گاوی (FBS) تکمیل می شود. FBS پروتئین ها و فاکتورهای رشد مورد نیاز را برای فرآیند کشت فراهم می کند.
pH محیط با افزودن بی کربنات سدیم تغییر می کند. PH محیط قبل از افزودن بی کربنات سدیم حدود 6.80 - 7.40 است، در حالی که pH پس از افزودن بی کربنات سدیم در محدوده 7.60 - 8.20 قرار دارد. دمای نگهداری محیط 2 تا 8 0C است.
شکل 02: DMEM
کاربردهای DMEM
- برای بررسی توانایی پلاک‌سازی پلیوماویروس در سلول‌های جنینی موش.
- در مطالعات مهار تماس.
- در تحقیق و تجزیه و تحلیل کشت سلولی مرغ.
شباهت‌های بین RPMI و DMEM چیست؟
- هر دو RPMI و DMEM در کشت سلولی حیوانی استفاده می شوند.
- هر دو محیط RPMI و DMEM فرمولاسیون مایع هستند.
- هر دو محیط RPMI و DMEM حاوی اسیدهای آمینه ضروری، ویتامین ها و نمک های معدنی مورد نیاز برای رشد هستند.
- هر دو رسانه RPMI و DMEM ناقص هستند. بنابراین، سرم باید اضافه شود.
- هر دو محیط RPMI و DMEM از گلوکز به عنوان منبع کربن خود استفاده می کنند.
- هر دو محیط RPMI و DMEM pH بالاتری دارند.
تفاوت بین RPMI و DMEM چیست؟
RPMI در مقابل DMEM |
|
| RPMI محیطی است که به طور گسترده برای کشت سلول های پستانداران در یک کشت سوسپانسیون استفاده می شود. | DMEM یک نوع اصلاح شده از محیط پایه با افزایش غلظت اسید آمینه و ویتامین است. |
| وجود فسفات اضافی | |
| ارائه در RPMI. | غایب در DMEM. |
| استفاده | |
|
برای کشت سلول ها در کشت های چسبنده استفاده می شود. استفاده شده است،
|
| انواع فرهنگ | |
| RPMI برای کشت های سوسپانسیون استفاده می شود. | DMEM برای کشت هایی با سلول چسبیده استفاده می شود. |
خلاصه - RPMI در مقابل DMEM
هر دو RPMI و DMEM به طور گسترده در کشت سلول های حیوانی به ویژه برای کشت رده های سلولی حیوانی از جمله لنفوسیت ها در شرایط آزمایشگاهی استفاده می شوند. DMEM یک محیط پایه اصلاح شده است که در آن غلظت مواد مغذی افزایش یافته است. RPMI توسط موسسه یادبود Roswell Park توسعه یافته است و همچنین محیطی است که در کشت سلول های حیوانی به ویژه برای لنفوسیت های پستانداران استفاده می شود.هر دو رسانه به صورت تجاری در دسترس هستند. این تفاوت بین RPMI و DMEM است.
