تفاوت اصلی بین الکتروپوریشن و میکرواینجکشن در این است که الکتروپوریشن تکنیکی است که از یک پالس الکتریکی با ولتاژ بالا برای رساندن DNA به سلول میزبان استفاده می کند، در حالی که میکرواینجکشن تکنیکی است که از یک سوزن شیشه ای با نوک ریز یا میکروپیپت برای رساندن DNA به داخل استفاده می کند. سلول های میزبان.
تبدیل فرآیندی است که طی آن DNA خارجی به سلول های میزبان منتقل می شود. با تبدیل، ساختار ژنتیکی ارگانیسم را می توان تغییر داد. روش های مختلف تبدیل شیمیایی، بیولوژیکی و فیزیکی وجود دارد. برخی روش های مستقیم و برخی روش های غیر مستقیم هستند. الکتروپوراسیون و میکرو تزریق دو روش فیزیکی هستند که از روشهای تبدیل مستقیم هستند.الکتروپوریشن از یک میدان الکتریکی برای القای منافذ میکروسکوپی در غشای سلولی بیولوژیکی استفاده می‌کند تا DNA را در سلول‌های میزبان ادغام کند. از سوی دیگر، میکرواینجکشن مستقیماً DNA را با استفاده از میکروپیپت یا سوزن شیشه ای با نوک ریز تحویل می دهد.
Electroporation چیست؟
Electroporation یک تکنیک تبدیلی است که DNA را به سلول های گیاهی و پروتوپلاست ها تحویل می دهد. این تکنیک از یک پالس الکتریکی با ولتاژ بالا استفاده می کند. مواد گیاهی در یک محلول بافر دارای DNA انکوبه می شوند. سپس محلول تحت یک پالس الکتریکی با ولتاژ بالا قرار می گیرد. منافذ القا شده با ولتاژ بالا در غشاهای سلولی گیاه ایجاد می شود و از طریق این منافذ، DNA به داخل سلول ها مهاجرت کرده و با DNA ژنومی گیاه ادغام می شود. کارایی این روش به مواد گیاهی و شرایط تیمار بستگی دارد.
شکل 01: Electroporation
وقتی تبدیل با استفاده از الکتروپوریشن انجام می شود، تنها 40 تا 50 درصد سلول ها DNA دریافت می کنند. علاوه بر این، تنها 50 درصد از سلول های تبدیل شده می توانند تحت این روش زنده بمانند. با این حال، انجام این روش آسان است و ساختار بیولوژیکی یا عملکرد سلول ها را تغییر نمی دهد. علاوه بر این، می توان از آن برای طیف وسیعی از سلول ها استفاده کرد.
Microinjection چیست؟
میکرواینجکشن یک تکنیک تبدیل است که به ویژه هنگام وارد کردن DNA به سلول های بزرگ مفید است. این روش از یک سوزن شیشه ای با نوک ریز یا یک میکروپیپت برای رساندن DNA به پروتوپلاست های گیاهی یا سلول های حیوانی (اووسیت ها، تخمک ها و جنین ها) استفاده می کند. در واقع این روش بیشتر برای ساخت حیوانات تراریخته مانند موش مناسب است. در این روش، DNA مستقیماً در هسته یا سیتوپلاسم وارد می شود.
مشابه الکتروپوریشن، میکرواینجکشن یک تکنیک تبدیل مستقیم است. میکرواینجکشن تحت یک میکروسکوپ تخصصی انجام می شود.کنترل کامپیوتری نگه‌داشتن پیپت، سوزن، مرحله میکروسکوپ و تکنولوژی ویدئویی، کارایی این تکنیک را افزایش داده است. هنگام تزریق DNA، می توان از رنگ برای شناسایی آسان سلول های تبدیل شده استفاده کرد. بنابراین نیازی به استفاده از روش جداگانه برای شناسایی سلول های تبدیل شده نیست. مهمتر از همه، روش میکرواینجکشن به ژن نشانگر نیاز ندارد.
شکل 02: میکرواینجکشن
علاوه بر این، این روش بسیار موثر و قابل تکرار است. با این حال، این روش پرهزینه، وقت گیر و نیاز به افراد ماهر است. همچنین تنها تعداد کمی از سلول ها را می توان با این روش درمان کرد.
شباهت های بین الکتروپوراسیون و میکرواینجکشن چیست؟
- هر دو الکتروپوریشن و میکرواینجکشن دو نوع تکنیک تبدیل هستند.
- این روش ها DNA را به سلول های گیاهی و پروتوپلاست ها می رسانند.
- آنها روش های مستقیم هستند.
- علاوه بر این، آنها روشهای فیزیکی یا مکانیکی هستند.
- هر دو روش برای تولید گیاهان و حیوانات تراریخته مفید هستند.
تفاوت بین الکتروپوراسیون و میکرواینجکشن چیست؟
تکنیک Electroporation از یک میدان الکتریکی برای معرفی DNA استفاده می کند در حالی که تکنیک microinjection یک میکروپیپت یا یک سوزن شیشه ای با نوک ریز برای معرفی DNA است. بنابراین، این تفاوت اصلی بین الکتروپوریشن و میکرواینجکشن است. علاوه بر این، الکتروپوریشن بیشتر برای سلول های گیاهی و پروتوپلاست ها استفاده می شود در حالی که تزریق میکروبی بیشتر برای سلول های حیوانی استفاده می شود. علاوه بر این، الکتروپوریشن به اندازه میکرواینجکشن وقت گیر نیست.
اینفوگرافیک زیر تفاوت های بین الکتروپوریشن و میکرواینجکشن را به صورت جدولی خلاصه می کند.
خلاصه - الکتروپوراسیون در مقابل میکرواینجکشن
Electroporation و microinjection دو روش فیزیکی انتقال ژن هستند. الکتروپوریشن از یک میدان الکتریکی با ولتاژ بالا استفاده می کند در حالی که میکرو تزریق از یک سوزن شیشه ای یا میکروپیپت استفاده می کند. بنابراین، این تفاوت اصلی بین الکتروپوریشن و میکرواینجکشن است. با این حال، هر دو روش مستقیماً DNA اگزوژن را به سلول‌های میزبان وارد می‌کنند.
