تفاوت کلیدی بین سنجش رنگ سنجی و فلورومتری این است که سنجش رنگ سنجی غلظت ترکیبات رنگی را در یک محلول تعیین می کند در حالی که سنجش فلورومتری مکانیسم جنبشی یک محلول را تعیین می کند.
سنجش بیوشیمیایی تکنیکی است که فعالیت یک مولکول یا ماده بیولوژیکی را به صورت تحلیلی تشخیص می دهد یا کمیت می کند. این یک فرآیند in vitro است. سنجش رنگ سنجی و سنجش فلورومتری دو نوع از سنجش های بیوشیمیایی رایج هستند که در آزمایشگاه ها انجام می شوند. تکنیک‌های متعددی مانند الایزا و وسترن بلات نیز سنجش‌های بیوشیمیایی پیچیده‌ای برای تعیین کمیت فعالیت متابولیک و اندازه‌گیری رفتار عملکردی مولکول‌های زیستی مانند پروتئین‌ها، آنزیم‌ها و سایر مولکول‌های کوچک هستند.این نوع سنجش ها برای شناسایی برهمکنش های پروتئین-DNA، پروتئین-RNA و پروتئین-پروتئین استفاده می شود.
سنجش رنگ سنجی چیست؟
سنجش رنگ سنجی تکنیکی است که غلظت ترکیبات رنگی را در محلول تعیین می کند. به عبارت دیگر، سنجش رنگ سنجی واکنشی است که منجر به تغییر رنگ در اثر واکنش آنزیمی یا شیمیایی بین معرف ها و آنالیت ها می شود. سنجش رنگ سنجی در بیوشیمی برای آزمایش آنزیم ها، ترکیبات خاص، هورمون ها، آنتی بادی ها و سایر آنالیت ها انجام می شود. از رنگ سنج یا اسپکتروفتومتر استفاده می کنند. رنگ سنج ها ابزارهایی هستند که نمونه های رنگی را مشخص می کنند تا معیاری عینی از ویژگی های رنگ ارائه کنند. اسپکتروفتومتر دستگاهی است که شدت نور را به عنوان تابعی از رنگ یا طول موج نور اندازه می‌گیرد.
شکل 01: سنجش رنگ سنجی
چگونه یک سنجش رنگ سنجی کار می کند؟
در یک سنجش رنگ سنجی، پلیتی با آنتی بادی خاصی که به چاهک متصل شده است، تهیه می شود. سپس نمونه اضافه می شود. این ممکن است به نمونه اجازه دهد تا به آنتی بادی متصل شود. سپس یک آنتی بادی تشخیص و یک بستر برای واکنش با پروب تشخیص به چاهک ها اضافه می شود. محلول استاپ در پایان قبل از خواندن اضافه می شود. یک چاه خالی به نام خالی بدون نمونه باقی می ماند. در روش رنگ سنجی، هر چه رنگ تیره تر باشد، غلظت آنالیت بیشتر است. معمولاً فقط یک طول موج برای خواندن لازم است. اما اگر اندازه گیری مرجع وجود داشته باشد، از دو یا چند طول موج استفاده می شود.
سنجش فلورومتری چیست؟
سنجش فلورومتری تکنیکی است که مکانیسم جنبشی واکنش های آنزیمی را تعیین می کند. یک سنجش فلورومتری با تشکیل یک محصول فلورسنت از یک بستر غیر فلورسنت یا بالعکس انجام می شود.این سنجش همچنین از انتقال انرژی رزونانس فلورسانس (FRET) استفاده می‌کند که در آن واکنش آنزیمی موقعیت دو فلوروفور را در بستر تغییر می‌دهد و در نتیجه شدت فلورسانس را تغییر می‌دهد.
شکل 02: سنجش فلورومتری
سنجش‌های فلورومتری معمولاً بسیار حساس‌تر از سنجش‌های دیگر هستند. تخمین آنزیم های تشخیصی در نمونه های بافت، سلول یا مایع بیماران به دلیل حساسیت بالاتر آن افزایش می یابد.
چگونه یک سنجش فلورومتری کار می کند؟
در یک سنجش فلورومتری، یک بستر به نمونه در پلیت اضافه می شود و پاسخ فلورسانس با استفاده از صفحه خوان گرفته می شود. در اینجا، هر سلول به طور جداگانه اندازه گیری می شود. صفحات مات در سنجش های فلورومتری استفاده می شوند. این امر باعث کاهش پراکندگی نور می شود.دو طول موج برای این نوع سنجش لازم است. یک طول موج برای تشخیص تحریک و طول موج دیگر برای انتشار است.
شباهت‌های بین سنجش رنگ‌سنجی و فلورومتری چیست؟
- سنجش رنگ سنجی و سنجش فلورومتریک دو نوع سنجش بیوشیمیایی هستند.
- هر دو سنجش برای تشخیص پزشکی انجام می شوند.
- این سنجش ها شامل یک واکنش آنزیمی است.
- هر دو سنجش شامل یک سوبسترا و آنالیت است.
تفاوت بین سنجش رنگ سنجی و فلورومتریک چیست؟
سنجش رنگ سنجی تکنیکی است که غلظت ترکیبات رنگی را در یک محلول تعیین می کند، در حالی که سنجش فلورومتری تکنیکی است که مکانیسم جنبشی واکنش های آنزیمی را تعیین می کند. بنابراین، این تفاوت اصلی بین سنجش رنگ سنجی و فلورومتری است. علاوه بر این، سنجش‌های فلورومتری حساس‌تر از سنجش‌های رنگ‌سنجی هستند. بنابراین، سنجش های فلورومتری توانایی تشخیص آنالیت های بیشتری را دارند.بنابراین، این یکی دیگر از تفاوت های مهم بین سنجش رنگ سنجی و فلورومتری است. علاوه بر این، سنجش های فلورومتری به دو طول موج نیاز دارند، در حالی که سنجش های رنگ سنجی با یک طول موج انجام می شوند.
جدول اینفوگرافیک زیر تفاوت های بیشتری را بین سنجش رنگ سنجی و فلورومتری نشان می دهد.
خلاصه - سنجش رنگ سنجی در مقابل فلورومتریک
سنجش بیوشیمیایی یک فرآیند تحلیلی است که برای تعیین و کمیت واکنش‌های متابولیک سلولی استفاده می‌شود. سنجش رنگ سنجی و سنجش فلورومتری دو نوع سنجش بیوشیمیایی هستند. سنجش رنگ سنجی واکنشی است که به دلیل یک واکنش آنزیمی یا شیمیایی بین معرف ها و آنالیت ها منجر به تغییر رنگ می شود در حالی که سنجش فلورومتری تکنیکی است که برای تعیین مکانیسم جنبشی واکنش های آنزیمی استفاده می شود. هر دو سنجش به یک واکنش آنزیمی که شامل یک سوبسترا و یک آنالیت است بستگی دارد. سنجش های فلورومتری حساس تر از سنجش های رنگ سنجی هستند. مهمتر از همه، سنجش های فلورومتری به دو طول موج نیاز دارند، در حالی که سنجش های رنگ سنجی تنها با یک طول موج قابل انجام هستند.بنابراین، این تفاوت بین سنجش رنگ سنجی و فلورومتری را خلاصه می کند.
