تفاوت اصلی بین BL21 و DH5 Alpha این است که BL21 یک سلول E.coli با دستکاری ژنتیکی با کمبود پروتئاز است که در درجه اول برای بیان پروتئین استفاده می شود، در حالی که DH5 آلفا یک سلول E. coli با مهندسی ژنتیکی با جهش recA1 است که عمدتاً استفاده می شود. برای تبدیل پلاسمید.
E. coli یکی از موجودات معروف منتخب برای تولید پروتئین نوترکیب است. در طول سال ها به محبوب ترین پلت فرم بیان تبدیل شده است. همچنین به عنوان کارخانه سلول استفاده می شود. BL21 و DH5 Alpha دو سلول E. coli مهندسی شده ژنتیکی هستند که در حال حاضر به ترتیب برای بیان پروتئین و تبدیل پلاسمید استفاده می شوند.
BL21 چیست؟
BL21 یک سلول E.coli با دستکاری ژنتیکی با کمبود پروتئاز است که در درجه اول برای بیان پروتئین استفاده می شود. E. coli BL21 یک سلول باکتریایی است که از سویه B مشتق شده است. دارای نقص پروتئاز Lon و پروتئاز غشای خارجی ompT است. معمولاً برای بیان پروتئین نوترکیب استفاده می شود زیرا به طور معمول باعث پایداری پروتئین های بیان شده می شود. BL21 برای بیان پروتئین با pCold I-IV DNA و pCold TF DNA مفید است. اما این سلول E. coli شایسته برای یک سیستم بیان پروتئین با استفاده از پروموتر T7 مانند سیستم pET در نظر گرفته نشده است. دلیل این امر این است که BL21 RNA پلیمراز T7 را بیان نمی کند. علاوه بر این، استفاده از آن برای ساخت و یا تهیه پلاسمید توصیه نمی شود زیرا جهش recA ندارد.
شکل 01: BL21
BL21 برای اولین بار توسط Studier در سال 1986 پس از تغییرات مختلف خط B توصیف شد. سلول های BL21 دارای کمبود پروتئاز LON هستند که بسیاری از پروتئین های خارجی را تجزیه می کند. علاوه بر این، ژن دیگری که پروتئاز غشای خارجی (OmpT) را کد می کند که عملکرد آن تجزیه پروتئین های خارج سلولی است را از دست داده است. کمبود این پروتئین ها باعث تولید موفقیت آمیز پروتئین خارجی در سلول های E. coli BL21 می شود. علاوه بر این، جهش hsdSB در این سلول ها از متیلاسیون DNA خارجی و اختلال در سلول های BL21 جلوگیری می کند.
DH5 Alpha چیست؟
DH5 Alpha یک سلول E. coli با مهندسی ژنتیک با جهش recA1 است که عمدتاً برای تبدیل پلاسمید استفاده می شود. سلول‌های DH5 Alpha E. coli توسط زیست‌شناس آمریکایی داگلاس هاناهان مهندسی ژنتیکی شده‌اند تا کارایی تبدیل را به حداکثر برسانند. سلول آلفا DH5 دارای سه جهش متمایز است: recA1، endA1 و lacZΔM15. recA1 یک جهش تک نقطه ای است که جایگزین گلیسین 160 با و یک باقیمانده اسید آسپارتیک در پلی پپتید recA می شود.این جهش فعالیت ریکبینازها را غیرفعال می کند و نوترکیبی همولوگ را غیرفعال می کند. جهش endA1 یک اندونوکلئاز درون سلولی را غیرفعال می کند که از تجزیه پلاسمید وارد شده توسط آن جلوگیری می کند.
شکل 02: DH5 آلفا
علاوه بر این، جهش lacZΔM15 غربالگری آبی-سفید سلول های تبدیل شده را امکان پذیر می کند. این سلول ها سلول های شایسته هستند. آنها اغلب با تبدیل کلرید کلسیم برای وارد کردن پلاسمید مورد نظر استفاده می شوند. با تحقیقات اخیر مشخص شد که سلول آلفا DH5 با روش Hanahan کارآمدترین سلول برای تبدیل پلاسمید است.
شباهت‌های بین BL21 و DH5 Alpha چیست؟
- BL21 و DH5 Alpha دو E.coli هستند که از نظر ژنتیکی دستکاری شده اند.
- هر دو سلول صالح هستند.
- آنها از جهش های متمایز تشکیل شده اند.
- هر دو زیستگاه طبیعی ندارند.
- اینها برای اهداف آزمایشگاهی مانند مطالعات بیان و روشهای شبیه سازی استفاده می شوند.
تفاوت بین BL21 و DH5 Alpha چیست؟
BL21 یک سلول E. coli با مهندسی ژنتیکی با کمبود پروتئاز است که در درجه اول برای بیان پروتئین استفاده می شود. از سوی دیگر، DH5 آلفا یک سلول E. coli با مهندسی ژنتیکی با جهش recA1 است که در درجه اول برای تبدیل پلاسمید استفاده می شود. بنابراین، این تفاوت اصلی بین BL21 و DH5 Alpha است. علاوه بر این، سلول BL21 E. coli دارای جهش recA1 نیست، در حالی که سلول DH5 Alpha E. coli دارای جهش recA1 است.
اینفوگرافیک زیر تفاوت‌های بین BL21 و DH5 Alpha را به صورت جدولی فهرست می‌کند.
خلاصه - BL21 در مقابل DH5 Alpha
سویه های غیر بیماری زا E. coli به طور ژنتیکی توسط دانشمندان برای مطالعات بیان آزمایشگاهی و اهداف شبیه سازی ایجاد شده اند. BL21 و DH5 Alpha دو سلول E. coli مهندسی شده ژنتیکی هستند. BL21 در درجه اول برای مطالعات بیان پروتئین استفاده می شود. از سوی دیگر، DH5 Alpha در درجه اول برای اهداف تبدیل پلاسمید استفاده می شود. بنابراین، این خلاصه تفاوت بین BL21 و DH5 Alpha است.
