تفاوت اصلی بین رسوب ایمنی و رسوب همزمان در این است که ایمونوفریشن تکنیکی است که پروتئین را با استفاده از یک آنتی بادی خاص از محلول رسوب می دهد، در حالی که رسوب همزمان یک تکنیک است که کمپلکس های پروتئینی دست نخورده را با استفاده از یک آنتی بادی خاص از محلول رسوب می دهد.
برهمکنش آنتی ژن-آنتی بادی یک برهمکنش شیمیایی خاص بین آنتی بادی های تولید شده توسط سلول های B و آنتی ژن ها (پروتئین ها) در طی یک واکنش ایمنی است. به طور معمول، آنتی ژن های محلول با آنتی بادی های محلول در حضور یک الکترولیت در دمای محلول و pH ترکیب می شوند تا یک مجتمع مرئی نامحلول ایجاد کنند.این واکنش رسوبی نامیده می شود. بنابراین، رسوب ایمنی و رسوب همزمان دو نوع واکنش رسوبی هستند که به طور معمول در آزمایشگاه ها برای شناسایی پروتئین هایی مانند آنتی ژن ها استفاده می شوند.
ایمنی رسوب چیست؟
ایمونوپسیتیشن تکنیکی برای رسوب دادن پروتئین از محلول با استفاده از یک آنتی بادی خاص است. گاهی اوقات، این روش به عنوان رسوب ایمنی فردی پروتئین نیز شناخته می شود. رسوب ایمنی از یک آنتی بادی برای جداسازی پروتئین انتخابی مورد نظر از لیزات سلولی استفاده می کند. آنتی بادی پروتئین هدف یا آنتی ژن خاص خود را از مخلوط خالص می کند. آنتی بادی به پروتئین متصل می شود و کمپلکس آنتی بادی-آنتی ژن از نمونه بیرون کشیده می شود. در تنظیمات آزمایشی، کمپلکس آنتی ژن-آنتی بادی با استفاده از آگارز همراه با پروتئین A/G یا دانه های مغناطیسی خارج می شود. بعداً دانه ها شسته می شوند و پروتئین مورد نظر شسته می شود. پروتئین یا آنتی ژن خالص شده به‌دست‌آمده از رسوب ایمنی با روش‌های مختلفی مانند سنجش ایمونوسوربنت متصل به آنزیم (ELISA) و وسترن بلات (WB) تأیید می‌شود.
شکل 01: رسوب ایمنی
علاوه بر این، پروتئین ها یا آنتی ژن های جدا شده را می توان از طریق طیف سنجی جرمی با استفاده از الگوهای هضم آنزیمی بر اساس توالی اولیه کمی سازی و شناسایی کرد. قبل از شروع آزمایش ایمونوفیلاسیون ملاحظات خاصی وجود دارد: انتخاب قالب روش، اتصال پروتئین ها و دانه ها، انتخاب آنتی بادی و ایزوتیپ اولیه مناسب، و کنترل منفی.
ایمنی رسوبی چیست؟
رسوب همزمان یک تکنیک رسوب کمپلکس های پروتئین دست نخورده از محلول با استفاده از یک آنتی بادی خاص است. رسوب همزمان به طور کلی با انتخاب یک آنتی بادی خاص عمل می کند که پروتئین شناخته شده (آنتی ژن) را هدف قرار می دهد که اعتقاد بر این است که عضوی از مجموعه بزرگتری از پروتئین ها است.با هدف قرار دادن عضو شناخته شده با یک آنتی بادی خاص، می توان کل مجموعه پروتئینی را از محلول بیرون کشید. این امکان شناسایی اعضای ناشناخته مجموعه را فراهم می کند. مفهوم بیرون کشیدن کمپلکس های پروتئینی از محلول گاهی اوقات به عنوان مکانیسم "کشیدن به پایین" نامیده می شود.
شکل 02: B همزمانی رسوب گیری
هم‌رسوب‌گذاری یک تکنیک قدرتمند است که برای تجزیه و تحلیل برهم‌کنش‌های پروتئین-پروتئین استفاده می‌شود. هدف اصلی از رسوب همزمان، شناسایی شرکای تعاملی مانند لیگاندها، کوفاکتورها یا مولکول های سیگنال دهنده به پروتئین مورد نظر است. علاوه بر این، رسوب همزمان یک تکنیک موثر است که برای جداسازی پروتئین ها از سرم، لیزات سلولی، بافت همگن یا محیط های شرطی شده استفاده می شود.
شباهت‌های بین رسوب ایمنی و رسوب همزمان چیست؟
- ایمونوپسیپیتاسیون و رسوب همزمان دو نوع تکنیک مبتنی بر واکنش بارش هستند.
- هر دو تکنیک را می توان برای شناسایی آنتی ژن هدف از طریق یک آنتی بادی خاص استفاده کرد.
- هر دو تکنیک به شدت به تعامل آنتی ژن-آنتی بادی بستگی دارد.
- آنها به طور معمول در آزمایشگاه های بالینی استفاده می شوند.
تفاوت بین ایمونوپسیپیتاسیون و رسوب همزمان چیست؟
رسوب ایمنی تکنیکی است که پروتئین را با استفاده از یک آنتی بادی خاص از محلول رسوب می دهد، در حالی که رسوب همزمان یک تکنیک است که با استفاده از یک آنتی بادی خاص، کمپلکس های پروتئینی دست نخورده را از محلول رسوب می دهد. بنابراین، این تفاوت اصلی بین رسوب ایمنی و رسوب همزمان است. علاوه بر این، رسوب ایمنی بیشتر در آزمایشگاه ها استفاده می شود، در حالی که رسوب همزمان در آزمایشگاه ها معمولاً استفاده نمی شود.
اینفوگرافیک زیر تفاوت‌های بین immunoprecipitation و coimmunoprecipitation را به شکل جدولی برای مقایسه کنار هم نشان می‌دهد.
خلاصه - ایمونوپسیپیتاسیون در مقابل رسوب همزمان
رسوب ایمنی و رسوب همزمان دو نوع تکنیک مبتنی بر واکنش رسوبی هستند که به برهمکنش آنتی ژن-آنتی بادی بستگی دارند. روش رسوب ایمنی پروتئینی را از محلول با استفاده از یک آنتی بادی خاص رسوب می دهد، در حالی که تکنیک رسوب همزمان با استفاده از یک آنتی بادی خاص، مجتمع های پروتئینی دست نخورده را از محلول رسوب می دهد. بنابراین، این تفاوت بین رسوب ایمنی و رسوب همزمان را خلاصه می کند.
