تفاوت کلیدی بین سنجش برادفورد و پروتئین لوری این است که سنجش پروتئین برادفورد بر اساس تغییر جذب رنگ Coomassie brilliant blue G-250 است در حالی که سنجش پروتئین Lowry بر اساس واکنش یون‌های مس (Cu+) است. تولید شده توسط اکسیداسیون پیوندهای پپتیدی با معرف Folin-Cioc alteu.
سنجش یک تکنیک تحلیلی است که به توصیف اجزای عملکردی اصلی یک نمونه کمک می کند. از این رو، یک سنجش می تواند یک آزمون کیفی یا کمی باشد. بسیاری از زمینه ها از جمله پزشکی آزمایشگاهی، فارماکولوژی، زیست شناسی محیطی، زیست شناسی مولکولی، بیوشیمی و ایمونولوژی از این نوع سنجش ها به طور معمول استفاده می کنند.سنجش پروتئین برادفورد و لوری دو سنجش بیوشیمیایی هستند که غلظت پروتئین را در محلول نمونه تعیین می کنند. هر دو سنجش از تکنیک های رنگ سنجی برای ارائه نتایج استفاده می کنند.
آزمایش پروتئین برادفورد چیست؟
سنجش پروتئین برادفورد یک روش تحلیلی طیف‌سنجی سریع برای آنالیز پروتئین است. هنگام اندازه گیری غلظت پروتئین در محلول دقت بالایی را نشان می دهد. ماریون برادفورد این روش را در سال 1976 معرفی کرد. در این روش، واکنش کل بر اساس ترکیب اسید آمینه پروتئین های اندازه گیری شده است. به عبارت دیگر، سنجش پروتئین برادفورد یک سنجش رنگ سنجی است. از رنگ آبی درخشان Coomassie استفاده می کند. از این رو، این سنجش پروتئین رنگ سنجی به تغییر جذب رنگ بستگی دارد. Coomassie brilliant blue G-250 در سه فرمت کاتیونی (قرمز)، آنیونی (آبی) و خنثی (سبز) وجود دارد. در شرایط اسیدی، شکل قرمز رنگ به آبی تبدیل می شود. اتصال پروتئین را تایید می کند. اگر پروتئین وجود نداشته باشد، محلول ممکن است به رنگ قهوه ای باقی بماند.
شکل 01: سنجش پروتئین برادفورد
سنجش پروتئین برادفورد با دیگر سنجش های پروتئینی متفاوت است زیرا کمتر مستعد تداخل ترکیبات شیمیایی مختلف موجود در محلول پروتئین است. این ترکیبات عبارتند از سدیم، پتاسیم، گلوکز و ساکارز و غیره.
آزمایش پروتئین Lowry چیست؟
سنجش پروتئین Lowry یک سنجش بیوشیمیایی است که برای تعیین سطح کل پروتئین در محلول استفاده می شود. Oliver H. Lowry فردی است که این معرف را در سال 1940 تولید کرد. این روش غلظت کل پروتئین محلول را با تغییر رنگ متناسب با غلظت پروتئین در محلول نشان می دهد. از این رو، این نیز یک سنجش پروتئین رنگ سنجی است.
واکنش بین یون‌های مس (Cu+) تولید شده توسط اکسیداسیون پیوندهای پپتیدی و معرف Folin-Cioc alteu اساس این روش است.همچنین این معرف حاوی اسید فسفومولیبدیک و اسید فسفر تنگستیک است. با این حال، مکانیسم واکنش سنجش پروتئین Lowry به خوبی شناخته نشده است. اما شامل اکسیداسیون باقیماندههای سیستئین، تریپتوفان و تیروزین با کاهش معرف Folin-Cioc alteu می‌شود.
شکل 02: سنجش پروتئین Lowry
باقی مانده های سیستئین به جذب مشاهده شده در سنجش پروتئین Lowry کمک می کنند و واکنش منجر به یک مولکول آبی درخشان می شود. هتروپلی مولیبدن آبی. کاهش این مولکول با جذب در 660 نانومتر اندازه گیری می شود. از این رو، غلظت باقیماندههای سیستئین و تریپتوفان که معرف Folin-Cioc alteu را کاهش می‌دهد، غلظت کل پروتئین را در محلول استنتاج می‌کند.
شباهت‌های بین سنجش پروتئین برادفورد و لوری چیست؟
- سنجش پروتئین برادفورد و لوری غلظت پروتئین را در محلول تعیین می کند.
- هر دو روش روش های رنگ سنجی هستند.
- همچنین حساسیت هر دو روش بالاست.
تفاوت بین سنجش پروتئین برادفورد و لوری چیست؟
سنجش پروتئین برادفورد و لوری دو نوع سنجشی هستند که غلظت پروتئین را در محلول تعیین می کنند. سنجش پروتئین برادفورد به تغییر جذب رنگ Coomassie brilliant blue G-250 متکی است در حالی که سنجش پروتئین Lowry به واکنش یون‌های مس تولید شده توسط اکسیداسیون پیوندهای پپتیدی، با معرف Folin-Cioc alteu بستگی دارد. بنابراین، این تفاوت اصلی بین سنجش پروتئین برادفورد و لوری است. آزمایش پروتئین برادفورد 15 دقیقه طول می کشد تا نتیجه حاصل شود در حالی که سنجش پروتئین Lowery 40-60 دقیقه برای ایجاد نتیجه طول می کشد. بنابراین، این تفاوت دیگری بین سنجش پروتئین برادفورد و لوری است. علاوه بر این، سنجش پروتئین برادفورد به ترکیب اسید آمینه وابسته است در حالی که سنجش پروتئین Lowry تا حدی به ترکیب اسید آمینه وابسته است.از این رو، این نیز تفاوتی بین سنجش پروتئین برادفورد و لوری است.
در زیر اینفورافیک جزئیات بیشتری در مورد تفاوت بین سنجش پروتئین برادفورد و لوری ارائه می دهد.
خلاصه - سنجش پروتئین برادفورد در مقابل لوری
آزایش یک تکنیک تحلیلی است که برای مشخص کردن اجزای عملکردی اصلی یک نمونه استفاده می شود. سنجش پروتئین برادفورد و لوری دو نوع سنجش پروتئین هستند که تحت تکنیک های رنگ سنجی عمل می کنند. هر دو سنجش پروتئین برادفورد و لوری غلظت پروتئین را در محلول تعیین می کنند. با این حال، تفاوت کلیدی بین Bradford و Lowry Protein Assay در تکنیک رنگ سنجی آنها نهفته است. سنجش پروتئین برادفورد از Coomassie برلیانت آبی G-250 استفاده می‌کند در حالی که سنجش پروتئین Lowry از یون‌های مس (Cu+) و معرف Folin-Cioc alteu استفاده می‌کند.علاوه بر این، روش برادفورد نتایج سریعی نسبت به سنجش پروتئین Lowry می دهد. با این حال، هر دو روش روش های بسیار حساسی هستند و در معرض تداخل مواد مختلف هستند.
