تفاوت کلیدی - هیبریداسیون درجا در مقابل ایمونوهیستوشیمی
تشخیص سرطان و بیماری‌های عفونی یک گرایش رایج است که در آن از تکنیک‌های جدید مبتنی بر پروتئومیکس و ژنومیک برای شناسایی تومورها یا سلول‌های عفونی، تکثیر آن‌ها و مکان‌های رشد سلولی و تجزیه و تحلیل اساس ژنتیکی بیشتر موارد قابل انتقال و انتقال استفاده می‌شود. بیماری های غیر مسری. این منجر به پردازش و طراحی دقیق دارو و توسعه درمان های سفارشی برای بیماری ها می شود. هیبریداسیون درجا (ISH) و ایمونوهیستوشیمی (IHC) دو تکنیک پرکاربرد در زیست شناسی سرطان هستند و تفاوت اصلی بین هیبریداسیون درجا و ایمونوشیمی در مولکول هایی است که در روش آنالیز استفاده می شود.در ISH، پروب های اسید نوکلئیک در تجزیه و تحلیل استفاده می شود، در حالی که، در IHC، از آنتی بادی های مونوکلونال و پلی کلونال برای تعیین تشخیص استفاده می شود.
هیبریداسیون درجا (ISH) چیست؟
هیبریداسیون درجا یک تکنیک هیبریداسیون اسید نوکلئیک است که مستقیماً بر روی بخشی یا بخشی از بافت، در کل بافت یا در سلول ها انجام می شود. این تکنیک به تئوری جفت شدن بازهای مکمل واتسون کریک بستگی دارد که منجر به هیبریدهای DNA-DNA یا هیبریدهای DNA-RNA می شود که می توانند ژن های جهش یافته را تشخیص دهند یا ژن مورد نظر مورد نیاز را شناسایی کنند. توالی‌های DNA تک‌رشته‌ای، توالی‌های DNA دو رشته‌ای، توالی‌های RNA تک‌رشته‌ای یا توالی‌های الیگونوکلئوتیدی مصنوعی به‌عنوان کاوشگر در طول تکنیک هیبریداسیون استفاده می‌شوند، و این پروب‌ها با فسفر رادیواکتیو در انتهای ۵ دقیقه‌اش برای شناسایی رویه‌های شناسایی با استفاده از اتورادیوگرافی یا برچسب‌گذاری شده با استفاده از روش dyefluorescent استفاده می‌شوند.. انواع مختلفی از تکنیک های ISH بر اساس نوع پروب مورد استفاده و نوع تکنیک تجسم دنبال شده وجود دارد.
شکل 01: هیبریداسیون فلورسنت درجا
کاربردهای زیادی از ISH وجود دارد، عمدتاً در تشخیص مولکولی بیماری های عفونی به منظور شناسایی حضور پاتوژن ها و تأیید پاتوژن از طریق تشخیص مولکولی. همچنین در زمینه های زیست شناسی رشد، کاریوتایپ و آنالیز فیلوژنتیک و نقشه برداری فیزیکی کروموزوم ها استفاده می شود.
ایمونوهیستوشیمی (IHC) چیست؟
در تکنیک IHC، مولکول اصلی مورد تجزیه و تحلیل آنتی ژن است. در طول IHC، آنتی بادی های مونوکلونال و پلی کلونال برای تعیین وجود آنتی ژن در هنگام عفونت یا وضعیت تکثیر سلولی بدخیم استفاده می شود. این تکنیک مبتنی بر اتصال آنتی ژن-آنتی بادی است و از برچسب های آنزیمی برای این تکنیک استفاده می شود. یکی از این کاربردها ELISA (Enzyme linked immunosorbent assay) است.نشانگرها همچنین می‌توانند آنتی‌بادی‌هایی با برچسب فلورسنت یا آنتی‌بادی‌های برچسب‌دار رادیویی باشند.
شکل 02: ایمونوهیستوشیمی
IHC به طور گسترده ای برای تشخیص سلول های سرطانی استفاده می شود. روش های تشخیصی آنتی ژن های موجود بر روی سلول های تومور را هدف قرار می دهند تا تومور را شناسایی و مشخص کنند. همین روش برای تشخیص عوامل عفونی گنجانده شده است. آنتی بادی های مونوکلونال و پلی کلونال نیز برای تجزیه و تحلیل محصولات ژنی مختلف با فعال کردن واکنش اتصال آنتی بادی به آنتی ژن بین پروتئین مورد نظر و آنتی بادی مصنوعی تجویز شده استفاده می شوند.
شباهت‌های بین هیبریداسیون In Situ و ایمونوهیستوشیمی چیست؟
- ISH و IHC واکنش های بسیار اختصاصی هستند.
- هر دو تکنیک بسیار دقیق هستند.
- هر دو تکنیک را می توان در تشخیص سرطان و بیماری های عفونی استفاده کرد.
- این تکنیک ها در محیط های استریل in-vitro انجام می شوند.
- هر دو تکنیک های سریعی هستند که نتایج قابل تکرار را ارائه می دهند.
- ISH و IHC از روش‌های تشخیص مانند برچسب‌گذاری رادیویی و تکنیک‌های فلورسانس استفاده می‌کنند.
تفاوت بین هیبریداسیون In Situ و ایمونوهیستوشیمی چیست؟
هیبریداسیون In Situ در مقابل ایمونوهیستوشیمی |
|
| ISH یک تکنیک هیبریداسیون اسید نوکلئیک است که مستقیماً بر روی یک بخش یا بخش از بافت یا کل بافت انجام می شود. | IHC تکنیکی است که در آن از آنتی بادی های مونوکلونال و پلی کلونال برای تعیین حضور آنتی ژن ها استفاده می شود که نشانگرهای پروتئین خاصی هستند که روی سطوح سلولی قرار می گیرند. |
| نوع مولکول‌های زیستی آنالیز شده | |
| ISH اسیدهای نوکلئیک را تجزیه و تحلیل می کند. | IHC پروتئین ها-آنتی ژن ها را تجزیه و تحلیل می کند. |
| اساس واکنش بیوشیمیایی | |
| جفت شدن مکمل بین DNA-DNA یا DNA-RNA در این تکنیک رخ می دهد. | برهم کنش های آنتی ژن-آنتی بادی در ایمونوهیستوشیمی نقش دارند. |
| روش‌های تشخیص مرتبط با آنزیم | |
| روش های تشخیص مرتبط با آنزیم را نمی توان در ISH استفاده کرد. | روش های تشخیص مرتبط با آنزیم را می توان در IHC استفاده کرد. |
خلاصه - هیبریداسیون درجا در مقابل ایمونوهیستوشیمی
تشخیص مولکولی روش‌های سریع و تاییدی هستند که می‌توانند برای شناسایی بیماری‌های غیرواگیر مانند سرطان یا بیماری‌های مسری مانند HIV یا سل بر اساس نشانگرهای مولکولی موجود در سلول‌ها که منجر به تظاهرات بیماری می‌شوند، استفاده شود..نشانگرهای مولکولی می‌توانند به شکل پروتئین‌های بیان‌شده یا در سطح ژنتیکی وجود داشته باشند که بر اساس آن تکنیک‌های جدید متفاوتی برای افزایش کارایی معرفی می‌شوند و زحمت کمتری دارند، اگرچه هزینه بالایی برای این تکنیک‌ها وجود دارد. بنابراین ISH به تشکیل هیبرید DNA-DNA یا DNA-RNA بستگی دارد و IHC به واکنش های خاص بین آنتی بادی و آنتی ژن بستگی دارد. این تفاوت بین هیبریداسیون درجا است.
دانلود نسخه PDF هیبریداسیون In Situ در مقابل ایمونوهیستوشیمی
می توانید نسخه PDF این مقاله را دانلود کنید و طبق یادداشت نقل قول برای اهداف آفلاین از آن استفاده کنید. لطفاً نسخه PDF را از اینجا دانلود کنید تفاوت بین هیبریداسیون درجا و ایمونوهیستوشیمی.
