تفاوت اصلی بین رنگ آمیزی گیمسا و رنگ آمیزی لیشمن این است که رنگ آمیزی گیمسا در رنگ آمیزی نواحی DNA کروموزوم های مختلف برای بررسی انحرافات مختلف مانند جابجایی ها و بازآرایی ها مفید است، در حالی که رنگ آمیزی لیشمن در هنگام رنگ آمیزی و تجزیه و تحلیل اسمیر خون مفید است. برای افتراق و شناسایی تریپانوزوم ها، لکوسیت ها و انگل های مالاریا.
رنگ‌آمیزی یک مرحله حیاتی در طول افزایش کنتراست تصویر میکروسکوپی در زمینه میکروسکوپ است، به‌ویژه برای برجسته کردن ساختارهای مختلف در سلول‌ها و بافت‌های بیولوژیکی. رنگ آمیزی گیمسا و لکه لیشمن از گروه لکه های رومانوفسکی هستند که شامل لکه رایت و لکه جنر نیز می شود.معمولاً لکه های رومانوفسکی برای رنگ آمیزی اسمیر خون مفید است. ما عمدتاً از این در طول مطالعه مورفولوژی گلبول های قرمز و عملکرد تعداد گلبول های سفید افتراقی استفاده می کنیم. رنگهای ائوزین Y و رنگهای لاجوردی B اجزای رایج برای لکه های رومانوفسکی هستند. روش‌های رنگ‌آمیزی رومانوفسکی به تشخیص بیماری‌های مختلف مانند لوسمی کمک می‌کند.
Gimsa Stain چیست؟
رنگ گیمسا معمولاً به تمایز بین مورفولوژی سیتوپلاسمی و هسته ای سلول های خونی مانند گلبول های سفید، گلبول های قرمز و پلاکت ها کمک می کند. همچنین به تمایز انگل ها کمک می کند. عمدتاً برای سیتوژنتیک و در تشخیص مالاریا و سایر بیماری های انگلی استفاده می شود. علاوه بر این، رنگ آمیزی گیمسا مخصوص گروه های فسفات موجود در DNA است. آنها به مناطقی که تعداد بیشتری پیوند آدنین-تامین در رشته DNA وجود دارد می‌چسبند.
شکل 01: لکه گیمسا
علاوه بر این، رنگ آمیزی گیمسا در باند گیمسا یا باند G برای رنگ آمیزی کروموزوم ها و ایجاد کاریوگرام نیز مفید است. بنابراین رنگ گیمسا توانایی شناسایی و تجسم ناهنجاری های مختلف در کروموزوم ها را دارد. به عنوان مثال، تروفوزوئیت تریکوموناس واژینالیس که ترشح سبز رنگی از خود خارج می کند و متشکل از سلول های متحرک روی مواد مرطوب است، با رنگ گیمسا رنگ آمیزی می شود. همانطور که در بالا ذکر شد، لکه گیمسا به عنوان یک لکه معمولی فیلم خون عمل می کند. هنگامی که رنگ آمیزی می شود، گلبول های قرمز به رنگ صورتی، پلاکت ها به رنگ صورتی روشن یا کم رنگ، و سیتوپلاسم لنفوسیت ها، مونوسیت ها و لکوسیت ها به ترتیب به رنگ آبی آسمانی، آبی کم رنگ و سرخابی رنگ می شوند.
رنگ Giemsa مخلوطی از ائوزین، متیلن بلو و آزور B است. مخلوط متیلن آزور که به همراه متیلن بلو یک ائوزینات تشکیل می دهد این مخلوط را تثبیت می کند.در فرآیند رنگ آمیزی گیمسا، ابتدا یک لایه نازک از نمونه بر روی یک لام میکروسکوپی قرار می گیرد. مرحله بعدی ثابت کردن با متانول خالص برای حدود 30 ثانیه با افزودن چند قطره متانول روی لام است. سپس لام را در محلول لکه 5% گیمسا به مدت 20-30 دقیقه غوطه ور می کنند. مرحله آخر این است که لام را با آب شیر بشویید و بگذارید خشک شود.
لکه لیشمن چیست؟
آسیب شناس اسکاتلندی ویلیام بوگ لیشمن توسعه دهنده لکه لیشمن است. یکی از لکه هایی است که در گروه لکه های رومانوفسکی قرار می گیرد. علاوه بر این، بیشتر در تمایز و شناسایی انگل‌های مختلف مالاریا، تریپانوزوم‌ها - یک تک یاخته تاژکدار تک سلولی، که انگلی و لکوسیت هستند، استفاده می‌شود.
شکل 02: لکه لیشمن
اساس رنگ آمیزی لیشمن یک مخلوط متانولی است که حاوی مخلوطی از متیلن بلو است که "پلی کروم" است. دی متیل شده به انواع مختلف لاجورد و ائوزین تبدیل می شود. با توجه به پایداری محلول استوک مخلوط متانولی، می‌توانیم مستقیماً از آن برای تثبیت اسمیر استفاده کنیم و در عین حال مرحله پیشوند را حذف کنیم. اگر محلول با یک بافر آبی مخلوط شود، پایداری کاهش می یابد. هنگام انجام شمارش افتراقی سلول ها، رنگ لیشمن رنگ بنفش روشن مشخصه ای را به هسته و گرانول های نوتروفیل می دهد. بنابراین، تمایز بین هسته و سیتوپلاسم را افزایش می دهد. همچنین لکه لیشمن در مقایسه با سایر لکه هایی که بر پایه متیلن بلو و ائوزین هستند، رنگ آمیزی کنتراست با کیفیت تری ایجاد می کند.
از آنجایی که اجزای مختلف سیتوپلاسمی به شدت برای تمایز و شناسایی مورد توجه قرار می گیرند، هماتولوژیست ها رنگ لیشمن را در مقایسه با سایر رنگ های رومانوفسکی ترجیح می دهند.در تشخیص انگل‌های مالاریا، روش‌های رنگ‌آمیزی لیشمن نسبت به سایر لکه‌ها مانند لکه فیلد حساس‌تر و دقیق‌تر است.
چه شباهت هایی بین لکه گیمسا و لکه لیشمن وجود دارد؟
- لکه گیمسا و لکه لیشمن لکه های افتراقی هستند.
- هر دو در هنگام انجام شمارش افتراقی گلبول های سفید و مطالعه مورفولوژی سلولی گلبول های قرمز مفید هستند.
- علاوه بر این، هر دو لکه متعلق به گروه لکه های رومانوفسکی هستند.
تفاوت بین لکه گیمسا و لکه لیشمن چیست؟
رنگ‌آمیزی گیمسا در رنگ‌آمیزی نواحی DNA کروموزوم‌های مختلف برای بررسی ناهنجاری‌های مختلف مانند جابه‌جایی‌ها و بازآرایی‌ها مفید است، در حالی که رنگ‌آمیزی لیشمن در رنگ‌آمیزی خون برای افتراق و شناسایی تریپانوزوم‌ها، لکوسیت‌ها و انگل‌های مالاریا مفید است. بنابراین، این تفاوت اصلی بین لکه گیمسا و لکه لیشمن است.
علاوه بر این، گوستاو گیمسا، باکتری‌شناس، تکنیک رنگ‌آمیزی گیمسا را توسعه داد، در حالی که آسیب‌شناس ویلیام بوگ لیشمن، تکنیک رنگ‌آمیزی لیشمن را توسعه داد. علاوه بر این، یکی دیگر از تفاوت های قابل توجه بین رنگ آمیزی گیمسا و رنگ لیشمن، ترکیب لکه است. رنگ آمیزی گیمسا مخلوطی از ائوزین، متیلن بلو و لاجورد B است در حالی که رنگ لیشمن یک مخلوط متانولی است که حاوی مخلوطی از متیلن بلو است.
خلاصه - Giemsa Stain در مقابل Leishman Stain
در زمینه میکروسکوپ، تکنیک‌های رنگ‌آمیزی نقش عمده‌ای در افزایش کنتراست تصاویر میکروسکوپی از بافت‌های مختلف بیولوژیکی دارند. رنگ‌آمیزی گیمسا در رنگ‌آمیزی نواحی DNA کروموزوم‌های مختلف برای بررسی انحرافات مختلف مانند جابه‌جایی‌ها و بازآرایی‌ها مفید است.رنگ لیشمن در رنگ آمیزی و تجزیه و تحلیل اسمیر خون برای افتراق و شناسایی تریپانوزوم ها، لکوسیت ها و انگل های مالاریا مفید است. بنابراین، این تفاوت بین لکه گیمسا و رنگ لیشمن است.
