تفاوت اصلی بین جداسازی DNA و RNA این است که جداسازی DNA روشی است که در آن نوعی اسید نوکلئیک به نام DNA از یک سلول بیولوژیکی استخراج می شود، در حالی که جداسازی RNA روشی است که در آن نوعی اسید نوکلئیک به نام RNA است. استخراج شده از یک سلول بیولوژیکی.
جداسازی اسید نوکلئیک نقطه شروع در مجموعه وسیعی از کاربردهای پایین دست است. کیفیت بالای اسیدهای نوکلئیک در نمونه های اولیه یک عامل کلیدی برای موفقیت برنامه های پایین دستی بعدی است. جداسازی اسید نوکلئیک را می توان به عنوان مجموعه ای از مراحل برای بدست آوردن اسید نوکلئیک در یک نمونه خلوص تعریف کرد که می تواند برای مراحل مختلف کاربرد پایین دست استفاده شود.هدف از استخراج اسید نوکلئیک تجزیه غشای سلولی و دستیابی به حداکثر حذف لیپیدها و پروتئین ها برای به دست آوردن اسیدهای نوکلئیک خالص مانند DNA یا RNA است.
جداسازی DNA چیست؟
جداسازی DNA یک روش معمول است که در آن نوعی اسید نوکلئیک به نام DNA از یک سلول بیولوژیکی استخراج می‌شود. جداسازی DNA با استخراج DNA از خون، نمونه های بافت منجمد و بلوک های بافت پارافینی انجام می شود. سه مرحله اصلی در جداسازی DNA شامل لیز سلولی، استخراج DNA و رسوب وجود دارد. در لیز سلولی، سلول‌های یک نمونه اغلب با ابزارهای فیزیکی مانند آسیاب کردن یا گرداب از یکدیگر جدا می‌شوند و در محلول حاوی نمک قرار می‌گیرند. معمولاً یون‌های سدیم با بار مثبت در نمک به محافظت از گروه‌های فسفات با بار منفی که در امتداد ستون فقرات DNA قرار دارند، کمک می‌کند. بعداً یک ماده شوینده برای تجزیه لیپیدهای غشای سلولی و هسته ها اضافه می شود که با از هم گسیختگی این غشاء DNA آزاد می شود.
شکل 01: جداسازی DNA
استخراج DNA برای به دست آوردن یک نمونه تمیز از DNA انجام می شود. اغلب، یک آنزیم پروتئاز برای تجزیه پروتئین های مرتبط با DNA و سایر پروتئین های سلولی اضافه می شود. علاوه بر این، برخی از زباله های سلولی را می توان با فیلتر کردن نمونه حذف کرد. در نهایت، DNA با استفاده از الکل رسوب می کند. علاوه بر این، اگر DNA زیادی وجود داشته باشد، یک رسوب سفید خسیسی در پایان عمل مشاهده می شود.
جداسازی RNA چیست؟
جداسازی RNA روشی است که در آن نوعی اسید نوکلئیک به نام RNA از یک سلول بیولوژیکی استخراج می شود. این روش اغلب با وجود آنزیم های ریبونوکلئاز در سلول ها و بافت هایی که RNA را تجزیه می کنند، پیچیده می شود. روش‌های مختلفی در زیست‌شناسی مولکولی برای جداسازی RNA از نمونه‌ها استفاده می‌شود، مانند استخراج گوانیدینیم-تیوسیانات-فنل-کلروفرم.
شکل 02: جداسازی RNA
جداسازی RNA معمولاً شامل چندین مرحله است، از جمله لیز سلولی و همگن سازی، خاموش کردن فرآیندهای بیوشیمیایی، تقسیم اسید نوکلئیک، بازیابی RNA، خالص سازی خام، و ارزیابی کیفیت RNA. روش لیز و شستشو مبتنی بر کاغذ فیلتر دارای ظرفیت عملیاتی بالایی در استخراج RNA است. علاوه بر این، استخراج RNA در نیتروژن مایع با استفاده از هاون و هاون نیز یک روش بسیار مفید است زیرا از فعالیت ریبونوکلئاز جلوگیری می کند.
شباهت بین جداسازی DNA و RNA چیست؟
- جداسازی DNA و RNA دو نوع روش جداسازی اسید نوکلئیک هستند.
- هر دو روش مراحل اولیه مشابهی دارند، مانند لیز سلولی، استخراج، و خالص سازی.
- این روش‌ها انواع مهم اسید نوکلئیک را که کاربردهای پایین دستی زیادی دارند، جدا می‌کند.
- آنها در تنظیمات آزمایشگاهی انجام می شوند.
- آنها را می توان با استفاده از کیت های ساخته شده انجام داد.
تفاوت بین جداسازی DNA و RNA چیست؟
در جداسازی DNA، نوعی اسید نوکلئیک به نام DNA از یک سلول بیولوژیکی استخراج می شود، در حالی که در جداسازی RNA، نوعی اسید نوکلئیک به نام RNA از یک سلول بیولوژیکی استخراج می شود. بنابراین، این تفاوت کلیدی بین جداسازی DNA و RNA است. علاوه بر این، جداسازی DNA معمولاً در pH 7 تا 8 انجام می شود در حالی که جداسازی RNA معمولاً در pH 4.5 انجام می شود.
اینفوگرافیک زیر تفاوت بین جداسازی DNA و RNA را به شکل جدولی برای مقایسه کنار هم نشان می دهد.
خلاصه - جداسازی DNA در مقابل RNA
جداسازی DNA و RNA دو نوع روش جداسازی اسید نوکلئیک هستند.جداسازی DNA روشی است که طی آن DNA از یک سلول بیولوژیکی استخراج می شود. جداسازی RNA روشی است که طی آن RNA از یک سلول بیولوژیکی استخراج می شود. بنابراین، این تفاوت کلیدی بین جداسازی DNA و RNA است.
