تفاوت کلیدی بین Pour Plate و Spread Plate در این است که حجم مشخصی از نمونه روی سطح محیط آگار در صفحه پخش پخش می شود، در حالی که در Pour plate حجم مشخصی از نمونه با آن مخلوط می شود. آگار و سپس در بشقاب ریخته می شود. هنگام مقایسه دقت این دو تکنیک، صفحه ریختن دقت بالاتری نسبت به صفحه پخش دارد.
روش استاندارد شمارش بشقاب یک رویکرد مبتنی بر رشد است که تعداد میکروارگانیسم‌های زنده (در حال رشد/قابل کشت/قابل حیات) را در یک نمونه شمارش می‌کند. این یک روش قدرتمند است که در بسیاری از زمینه های میکروبیولوژیکی برای تجزیه و تحلیل تعداد میکروارگانیسم های زنده استفاده می شود.زمینه هایی مانند غذا و لبنیات، پزشکی، محیط زیست، آبزیان و کشاورزی، ژنتیک میکروبی، میکروبیولوژی مولکولی، توسعه محیط رشد و بیوتکنولوژی (فناوری راکتورهای زیستی، تخمیر، تصفیه فاضلاب/فاضلاب و غیره) از این تکنیک استفاده می کنند. علاوه بر این، دو راه اصلی برای انجام یک شمارش استاندارد پلیت وجود دارد: آنها، تکنیک صفحه پهن و تکنیک صفحه ریختن.
Pour Plate چیست؟
تکنیک Pour plate یک روش میکروبی برای شمارش برخی از سلول های زنده موجود در نمونه است. ویژگی روش بشقاب ریختن این است که حجم مشخصی از نمونه ابتدا با آگار مخلوط می شود و سپس در پلیت ریخته می شود.
شکل 01: بشقاب ریختن
سایر مراحل مشابه تکنیک صفحه پهن است که در بخش بعدی مورد بحث قرار گرفت.مرحله بعدی پس از ریختن آگار مخلوط شده با نمونه، اجازه دادن به جامد شدن و جوجه کشی آن است. پس از انکوباسیون، شمارش تعداد کلنی های زنده برای محاسبه CFU نهایی برای 1 گرم یا 1 میلی لیتر ضروری است.
Spread Plate چیست؟
Spread Plate تکنیکی برای شمارش سلول های زنده در یک نمونه است. برای این تکنیک، یک رقت سریال برای نمونه لازم است تا اطمینان حاصل شود که حداقل یکی از آنها تعداد قابل شمارش کلنی را ایجاد می کند. فرآیند در اینجا به این صورت است که حجم مشخصی از رقت را روی سطح یک صفحه آگار پیپت می کنیم و آن را به سرعت و به طور یکنواخت روی سطح آگار با یک پخش کننده شیشه ای که شعله الکل و خنک شده است پخش می کنیم. انجام تکرارها برای به دست آوردن یک مقدار میانگین قابل اعتماد ضروری است. مرحله بعدی این است که این صفحات را برای مدت کوتاهی خشک کنید و سپس آن ها را برعکس کنید و در یک انکوباتور در دمای مناسب برای رشد و برای دوره کمون قرار دهید.
شکل 02: صفحه پخش
پس از انکوباسیون، بررسی صفحات رشد را نشان می دهد. در یک یا چند رقت، تعداد سلولهای موجود در تلقیح‌کننده‌ها (مثلاً 100 یا 200 میکرولیتر) بین 30 تا 300 کلنی مجزا در سطح آگار ایجاد می‌کند. تعداد کمتر از 30 کلنی از نظر آماری غیر قابل اعتماد است. شمارش تعداد بالای 300 دشوار است و مستعد خطا هستند.
شباهت‌های بین بشقاب ریختن و صفحه پخش چیست؟
- Spread Plate و Pour Plate دو تکنیک برای به دست آوردن تعداد سلولهای زنده موجود در یک نمونه هستند.
- هر دو روش مستقیم هستند.
- خطاهای نمونه گیری ممکن است در هر دو روش رخ دهد.
- محدودیت شرایط رشد بر نتیجه هر دو روش تأثیر می گذارد.
- خطاهای فنی نیز می توانند در نتیجه نهایی هر دو روش اختلال ایجاد کنند.
- هر چند قابل دوام است، اما این دو روش برای رشد باکتری های غیرقابل کشت استفاده نمی شوند.
تفاوت بین بشقاب ریخته گری و صفحه پخش چیست؟
Pour plate یک تکنیک میکروبی برای شمارش تعدادی از سلول های زنده در یک نمونه است. تکنیک Spread Plate تکنیک دیگری برای شمارش باکتری های رشد یافته در سطح محیط است. در تکنیک pour plate، فرآیند به این صورت است که نمونه را روی سطح محیط جامد شده روی صفحه ریختن اضافه می کنیم. اما، در تکنیک صفحه spred، فرآیند به این صورت است که نمونه را با آگار مذاب مخلوط می‌کنیم و سپس آن را در صفحه می‌ریزیم.
با توجه به دقت این دو تکنیک، پلاک ریختن دقت بالاتری نسبت به صفحه پخش دارد. علاوه بر این، برخلاف صفحه ریختنی، از پخش کننده شیشه ای برای پخش یکنواخت نمونه بر روی سطح روی صفحه پخش استفاده می شود. همچنین با استفاده از صفحه ریزش می توان هوازی، بی هوازی و بی هوازی اختیاری را برشمرد. با این حال، با استفاده از صفحه پخش فقط می توان هوازی ها را برشمرد.علاوه بر این، صفحات آگار جامد برای اجرای صفحه پخش ضروری هستند در حالی که محیط های آگار مذاب مایع برای روش ریختن ضروری هستند.
خلاصه - Pour Plate vs Spread Plate
Pour plate و Spread plate دو تکنیک در میکروبیولوژی برای تسهیل شمارش سلول های میکروبی در یک نمونه هستند. هر دو روش مبتنی بر رشد هستند، بنابراین سلول های زنده را اندازه گیری کنید. در طول صفحه ریختن، حجم مشخصی از نمونه با آگار مذاب مخلوط شده و درون صفحه ریخته می شود. در طول صفحه پخش، یک حجم شناخته شده روی سطح محیط آگار جامد شده پخش می شود. این تفاوت بین بشقاب ریختن و صفحه پخش است.
